pLKO-p53-shRNA-941人源基因干扰质粒_价格_上海钦诚生物科技有限公司

产品详情

pLKO-p53-shRNA-941人源基因干扰质粒

基本信息

启动子: U6 promoter

复制子: pUC ori,F1 ori,SV40 ori

终止子: cPPT/CTS , 3

质粒分类: RNA文库质粒；RNA人源质粒；shRNA人源质粒

质粒大小: 7083bp

原核抗性: Amp（100μg/ml）

筛选标记: Puro

克隆菌株: Stbl3

培养条件: 37℃，LB，有氧

表达宿主: 293T等哺乳细胞

培养条件: 37℃，5%CO2

诱导方式: 无需诱导

5'测序引物: U6-F（ATGGACTATCATATGCTTACCGTA）

3'测序引物: pLKO-R（CTGCACTGTACCCCCCAATC）

备注: P53序列：NM_000546。 P53-shRNA-941序列：CCGGCACCATCCACTACAACTACATCTCGAGAT GTAGTTGTAGTGGATGGTGTTTTT

质粒简介

pLKO-p53-shRNA-941质粒是在pLKO.1-Puro载体上克隆了一段shRNA序列得到的一个哺乳细胞慢病毒RNA干扰质粒。U6启动P53shRNA-941的转录，可特异性的干扰P53蛋白的表达。该质粒可作为普通过表达质粒直接转染哺乳细胞，也可包装成慢病毒侵染细胞。质粒本身带有Puro筛选标记，可用嘌呤霉素筛选转染后的细胞得到阳性克隆。

质粒图谱

pLKO-p53-shRNA-941人源基因干扰质粒使用说明：

1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；

2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；

3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；

4、42℃热激90s，再冰浴2min；

5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；

6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；

7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；

8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；

9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。

pLKO-p53-shRNA-941人源基因干扰质粒注意事项：

1、如果您收到的是甘油菌种，请先四区划线，挑取单克隆培养。

2、如果第二天转化平板长的过多，请将质粒按比例稀释后再转化。

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供货周期：	现货
品牌：	钦诚生物
型号：	2UG
货号：	QCP1210