供货周期: | 现货 |
品牌: | 钦诚生物 |
规格: | 2UG |
货号: | QCP0323 |
CAS号: |
pET28a-ULP(SUMO)切割酶基因质粒
基本信息
启动子: T7/lac
复制子: pUC ori,f1 ori
终止子: T7-ter
质粒分类: 蛋白酶表达质粒
质粒大小: 5962bp
质粒标签: N-His,ULP
原核抗性: 卡那霉素Kanamycin
克隆菌株: DH5α
培养条件: 37℃,有氧,LB
表达宿主: BL21 DE3
培养条件: 37℃,有氧,LB
诱导方式: IPTG或乳糖及其类似物
5'测序引物: T7:TAATACGACTCACTATAGGG
3'测序引物: T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
备注: pET28a-ULP/SUMO质粒表达ULP酶,可以切割SUMO蛋白
质粒图谱
pET28a-ULP(SUMO)切割酶基因质粒使用说明:
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;
2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;
3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;
4、42℃热激90s,再冰浴2min;
5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;
6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;
7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;
8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;
9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。
pET28a-ULP(SUMO)切割酶基因质粒注意事项:
1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。
2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。
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