pLVX-DsRed-Monomer-N1慢病毒表达质粒

参考价:¥980
供货周期: 现货
品牌: 钦诚生物
规格: 2UG
货号: QCP0252
CAS号:
上海钦诚生物科技有限公司
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产品详情

pLVX-DsRed-Monomer-N1慢病毒表达质粒

 

基本信息

 

启动子: PGK ,CMV

复制子: pUC ori

终止子: SV40 poly(A) signal

质粒分类: 病毒系列,慢病毒克隆载体

质粒大小: 8751bp

原核抗性: Amp

筛选标记: Puro

克隆菌株: Stbl3

培养条件: 37℃,有氧 LB

表达宿主: 哺乳细胞

诱导方式: 无须诱导,瞬时表达

5'测序引物: CMV-FCGCAAATGGGCGGTAGGCGTG

3'测序引物: 根据序列设计引物

 

质粒简介

    plvx-dsred-monomer-n1HIV-1,慢病毒表达载体,允许你表达你的感兴趣的基因融合,DsRed Monomer,一个单体的突变红色荧光蛋白Discosoma sp.。基因克隆到多克隆位点(MCS),位于单体的基因编码序列上游,表示为N的单体蛋白融合蛋白。融合蛋白的表达是由组成性激活人类巨细胞病毒立即早期启动子(CMV)位于只是上游的MCS。慢病毒颗粒来自矢量允许表达红色荧光蛋白的单体融合蛋白在几乎任何类型的细胞,包括原代细胞。这个DsRed Monomer表示,未改性的载体,可用于生产标记病毒优化感染协议。

    plvx-dsred-monomer-n1包含所有必要的病毒处理单元复制无能的病毒生产,以及元素来提高病毒滴度,转基因表达和整体载体功能。土拨鼠肝炎病毒转录后调节元件(WPRE)促进RNA处理事件提高病毒和转基因RNA的核出口,导致病毒滴度增加包装细胞,并增强你的基因在靶细胞中的表达。此外,载体包括Rev应答元件(RRE),从而进一步增加病毒滴度提高拼接的病毒RNA转运出细胞核。最后,pLVX DsRedmonomer-n1还包含一个中央聚嘌呤道(CPPT)元,增加核在靶细胞感染过程中输入病毒基因组,导致改进的载体整合与更有效的转导。

pLVX-DsRed-Monomer-N11.png

 

质粒图谱pLVX-DsRed-Monomer-N1.png

 

 

pLVX-DsRed-Monomer-N1慢病毒表达质粒使用说明:

    

     1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl无菌水溶解质粒,室温放置1min;

     2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态,置于冰盒上解冻,并做好标记;

     3、取2μl质粒加至100μl感受态中,冰浴30min;

     4、42℃热激90s,再冰浴2min;

     5、加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡培养45min;

     6、6000rpm离心5min,仅留100ul上清混匀菌体沉淀;

     7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上,倒入适量玻璃珠,涂匀液体;

     8、将平板正向培养1h,再倒置培养12h~16h;

     9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中,震荡培养12h~16h,根据实验需要提取质粒。

 

pLVX-DsRed-Monomer-N1慢病毒表达质粒注意事项

 

      1、如果您收到的是甘油菌种,请先四区划线,挑取单克隆培养。

      2、如果第二天转化平板长的过多,请将质粒按比例稀释后再转化。

 


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