供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | T25培养瓶,1×10的6次方cells |
货号: | ZY-4006H |
CAS号: |
RWPE-1细胞
细胞名称:人正常前列腺上皮细胞;RWPE-1
规格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征: 上皮细胞样
生长特性:贴壁
RWPE-1细胞描述:
RWPE-1细胞一位正常男性前列腺组织切片的周围区域的上皮细胞用单拷贝的HPV-18进行转化,建立了RWPE-1细胞株. 在三维Matrigel培养时,在雄激素作用下,RWPE-1细胞形成腺胞并向培养基中分泌PSA。当与Matrigel或基质细胞混合注射雄性裸鼠时,RWPE细胞也会形成腺胞并向培养基中分泌PSA。用Ki-MuSV病毒继续感染RWPE-1细胞系构建了具致瘤性的RWPE-2和RWPE2-W99细胞系。并用MNU处理后构建了一系列模拟不同阶段先列腺癌的细胞系,如WPE1-NA22、WPE1-NB14 、WPE1-NB11 和WPE1-NB26等。
培养条件:K-SFM(GIBCO 10744)
传代方法: 1:3-1:5传代,消化5-8分钟。每2天换液1次。
RWPE-1细胞STR位点信息:
STR Profile | AMEL | CSF1PO | D13S317 | D16S539 | D5S818 | D7S820 | TH01 | TPOX | vWA |
RWPE-1 | X,Y | 13 | 8,14 | 9,11 | 12,15 | 10,11 | 8,9.3 | 8,11 | 14,18 |
支原体感染会造成什么后果?
1、改变细胞膜状态
2、改变细胞生长习性
3、破坏细胞染色质
4、改变细胞表型
5、降低转染/转导效率
6、交叉感染其他细胞系
以上所有都会导致实验结果不可靠,重复性低!
RWPE-1细胞准备:
培养RWPE-1细胞之前必须有充足的思想准备,这株细胞非常好养,而且不能偷懒,必须勤快。细胞对氧气、密度和养分非常敏感,稍微偷懒拖一天不换液,可能就会导致细胞全部死亡的后果。只要保持换液和传代频率,多注意细胞密度,这株细胞还是可以征服的!
RWPE-1细胞培养技巧:
建议平躺着培养该细胞,以增大空气交换面积,且液体高度最好不要超过3mm,一般T25培养瓶加6-8ml培养基,T75培养瓶加15ml左右培养基即可。培养基尽量现配,配好的培养基最好两周内用完,因为叶酸不稳定易分解。
一般情况下细胞2-3天换液一次,即使培养基没有变黄。换液时轻轻侧过培养瓶/皿,不要使细胞飘起来,用巴氏吸管轻轻吸取部分上清弃去,补加等体积的新鲜培养基继续培养。或者将全部培养液转移至离心管中,1000rpm离心5min,吸去上清后用新鲜培养轻轻重悬后重新种瓶,重悬时不可吹打过度。细胞对离心和吹打比较敏感,离心和反复吹打会影响细胞状态,建议只在细胞产生大量碎片时才离心清洗。平常换液建议半换,传代可直接补加足够新鲜的培养基后直接分瓶。
细胞团长至肉眼可见,且T25瓶子有几十上百个小团时,细胞数量已经比较多,此时应该2天换液一次。当一个20倍视野有4-5个大细胞团时应该进行传代。传代时加入两倍体积的新鲜培养基后,轻轻吹打细胞团,将大的细胞团打散成小团,但不要剧烈吹打成单细胞悬液,因为单个的细胞是基本没有增殖活力的细胞,然后将混匀的细胞悬液转移至新的培养瓶中。或者将细胞悬液转移至离心管中,1000rpm离心5min后,弃去上清,加入三倍体积的新鲜培养基轻轻重悬后转移至三个新的培养瓶中。
冻存液用50%血清+40%完全培养基+10%DMSO。细胞数量应在0.5-1.0×106/ml为宜。复苏时可适当加大胎牛血清的含量,以使细胞尽快长起来。复苏后细胞需要重新聚团及较长的潜伏期,故复苏时间较长,期间应多加观察,并注意更换培养基,频率为3天一换(半换)。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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