Rosetta 2(DE3)感受态细胞

参考价:¥1280
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 100μl/支
货号: ZY1014
CAS号:
上海泽叶生物科技有限公司
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产品详情

Rosetta 2(DE3)感受态细胞
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell

Rosetta 2(DE3)感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1014)

Rosetta 2(DE3):                                               100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                           10μl

保存条件(保质期):                                   -80℃(6个月) 


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基因型

F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)


Rosetta 2(DE3)感受态细胞产品说明

Rosetta 2(DE3)菌株来源于BL21,是BL21的衍生菌株,为Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,这两种酶的缺失有效防止异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。将具有氯霉素抗性的pRARE2质粒导入BL21 (DE3)细胞中即是Rosetta 2(DE3),pRARE2质粒可补充大肠杆菌缺乏的7种稀有密码子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)对应的tRNA,提高外源基因的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。Rosetta 2(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达10cfu/μg DNA。


Rosetta 2(DE3)感受态细胞操作方法

1. Rosetta 2(DE3)感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的LB无菌培养液,37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取50 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。



图片17.png

 

Rosetta 2(DE3)感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

3. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-10 mM均可)。

4. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

5. Rosetta 2(DE3) 菌株携带 pRARE2质粒,除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有34 μg/ml氯霉素,以防质粒丢失。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


Rosetta 2(DE3)感受态细胞信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于Rosetta 2(DE3)感受态细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应Rosetta 2(DE3)感受态细胞外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供DH5α热激感受态细胞、DH5α电转感受态细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

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