供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 100μl/支 |
货号: | ZY1007 |
CAS号: |
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL Chemically Competent Cell
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1007)
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL: 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存条件(保质期): -80℃(6个月)
基因型
F–ompT hsdS(rB–mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [argU proL CamR] [argU ileY leuW Strep/SpecR]
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞产品说明
BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL菌株来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子 (AGA, AUA, CCC, CUA)对应的tRNA (argU, ileY, proL, leuW),提高外源基因,尤其是富含AT-或 GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列、pGEX、pMAL等质粒的蛋白表达,同时具有四环素,氯霉素,链霉素,壮观霉素抗性。BL21- CodonPlus(DE3)-RIPL 感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率高达108 cfu/μg DNA。
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞操作方法
1. BL21-CodonPlus(DE3)-RIPL感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。
4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT 或LB培养基上。
5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞注意事项
1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
2. 混入质粒时应轻柔操作。
3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。
5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
相关产品
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa, 双色)
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)
Minerva Super Fusion Cloning Kit(无缝克隆试剂盒)
Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖检测试剂盒
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
呋喃西林快速检测卡
呋喃妥因快速检测卡
呋喃它酮快速检测试剂盒
呋喃妥因快速检测试剂盒
呋喃西林快速检测试剂盒
关注
拨打电话
留言咨询