OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞

参考价:¥1280
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 100μl/支
货号: ZY1021
CAS号:
上海泽叶生物科技有限公司
银牌会员5年生产商
关注展位 全部试剂
产品详情

OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞
OrigamiB(DE3)pLysS Chemically Competent Cell

OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1021)

OrigamiB(DE3)pLysS:                               100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

保存条件(保质期):                             -80℃(6个月) 


2015092881872913.jpg

基因型

F-ompT hsdSB(rB-mB-) gal dcm lacY1 ahpC (DE3) gor522::Tn10 trxB (KanR,TetR) pLysS CamR

OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞产品说明

Origami B (DE3) pLysS菌株携带pLysS质粒,具有氯霉素抗性。pLysS可表达T7溶菌酶(T7溶菌酶可以作用于大肠杆菌细胞壁上的肽聚糖溶解大肠杆菌,还可与T7 RNA聚合酶结合抑制其转录活性,进而降低目的基因的背景表达水平,但不干扰IPTG诱导的表达),适合表达毒性蛋白和非毒性蛋白。Origami B (DE3) pLysS菌株表达突变的硫氧还蛋白还原酶 (thioredoxin reductase) (trxB)和谷胱甘肽还原酶 (glutathione reductase) (gor),这两个酶是还原途径的关键酶,突变后有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。 此外,该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区 (DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达,具有氯霉素、卡那霉素和四环素抗性,不能用于具有氯霉素,卡那霉素抗性质粒的表达。Origami B (DE3) pLysS感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达10cfu/μg DNA。

OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞操作方法

1. Origami B (DE3) pLysS感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒,并用手拨打EP     管底混匀,冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰中并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (2YT或LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。



图片17.png

 

OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒时应轻柔操作,转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

3. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2 mM均可)。

4. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

5. 具有氯霉素,卡那霉素和四环素抗性,不能用于具有氯霉素,卡那霉素和四环素抗性质粒的表达。


特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供DH5α热激感受态细胞、DH5α电转感受态细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

相关试剂 更多

相关产品

当前位置: 仪器信息网 泽叶生物 试剂 OrigamiB(DE3)pLysS感受态细胞

关注

拨打电话

留言咨询