ER2566感受态细胞

参考价:¥1280
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 100μl/支
货号: ZY1060
CAS号:
上海泽叶生物科技有限公司
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产品详情

ER2566感受态细胞
 ER2566 Chemically Competent Cell

ER2566感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1060)

ER2566:                                                    100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                    10μl

保存条件(保质期):                             -80℃(6个月) 

2015092881872913.jpg

基因型

F- λ- fhuA2 [lonomplacZ::T7 gene1 gal sulA11 Δ(mcrC-mrr)114::IS10 R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]


ER2566感受态细胞产品说明

ER2566菌株是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株,来源于BL21。Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达,可用于T7启动子表达载体(如pET系列)的高水平蛋白表达。fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。同时ER2566为lon 和 ompT蛋白酶缺陷菌株。Lon蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解,Δ(mcrC-mrr)114,mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制,提高了外源甲基化DNA的转化效率。ER2566感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达10cfu/μg DNA。


ER2566感受态细胞操作方法

1.ER2566感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。

2. 42水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37200rpm复苏60分钟。

4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。

5. 将平板倒置放于37培养箱过夜培养。



图片17.png

 

ER2566感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


ER2566感受态细胞信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于ER2566感受态细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应ER2566感受态细胞外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供DH5α热激感受态细胞、DH5α电转感受态细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

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