M15(pREP4)感受态细胞

参考价:¥1280
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 100μl/支
货号: ZY1090
CAS号:
上海泽叶生物科技有限公司
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产品详情

M15(pREP4)感受态细胞
M15(pREP4) Chemically Competent Cell

M15(pREP4)感受态细胞产品规格(CAT#:ZY1090)

M15(pREP4):                                                   100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                           10μl

保存条件(保质期):                                   -80℃(6个月) 

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基因型

F-Φ80ΔlacM15, thi, lac-, mtl-, recA+, KmR

M15(pREP4)感受态细胞产品说明

M15(pREP4)蛋白表达菌株含有pREP4质粒,该质粒通过p15A复制子启动复制,可以与许多原核表达质粒共存于同一大肠杆菌细胞中;同时该质粒携带lac I基因,可高效表达lac 抑制蛋白,在IPTG诱导前可抑制目标蛋白的本底表达,特别适合毒性基因的表达。M15(pREP4)菌株是PQE系列质粒的配套菌株,特别适合PQE系列质粒或由E.coli T5 启动子诱导表达的质粒的蛋白表达。pREP4质粒赋予该菌株卡那霉素抗性。唯地生物生产的M15(pREP4)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达2×108cfu/μg DNA。


M15(pREP4)感受态细胞操作方法

1. M15(pREP4)感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒并用手拨打EP管底混匀,冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取50 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上(若质粒浓度较高,也可稀释后涂板,务必保证能在平板上挑到单克隆菌落)。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养,M15(pREP4)菌株在平板或液体培养基中生长时,需在培养基中加入终浓度为35ug/ml的卡那霉素。



图片17.png

 

M15(pREP4)感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. M15(pREP4)菌株在平板或液体培养基中生长时,需在培养基中加入终浓度为35ug/ml的卡那霉素。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


M15(pREP4)感受态细胞信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于M15(pREP4)感受态细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应M15(pREP4)感受态细胞外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供JM109热激感受态细胞、Mach1-T1热激感受态细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

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