ArcticExpress (DE3)感受态细胞

参考价:¥1280
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
规格: 100μl/支
货号: ZY2020
CAS号:
上海泽叶生物科技有限公司
银牌会员5年生产商
关注展位 全部试剂
产品详情

ArcticExpress (DE3)感受态细胞
ArcticExpress (DE3) Chemically Competent Cell

ArcticExpress (DE3)感受态细胞产品规格(CAT#:ZY2020)

ArcticExpress (DE3):                                       100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                           10μl

保存条件(保质期):                                   -80℃(6个月) 


2015092881872913.jpg

基因型

E. coli B F– ompT hsdS(rB– mB–) dcm+ TetR gal λ(DE3) endA Hte [cpn10cpn60 GentR]


ArcticExpress (DE3)感受态细胞产品说明

ArcticExpress (DE3)来源于E. coli B,为Lon和OmpT蛋白酶缺陷型菌株,可促进表达蛋白的稳定。ArcticExpress (DE3)菌株染色体DNA中整合了λ噬菌体DE3区,使得ArcticExpress (DE3)菌株可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,广泛用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。ArcticExpress (DE3)菌株具有四环素,庆大霉素抗性,endA1突变有利于质粒DNA的稳定。[cpn10cpn60 GentR]的存在使ArcticExpress (DE3)可以表达适应低温的伴侣蛋白Cpn10和Cpn60(来自嗜冷菌—Oleispira antarctica)。Cpn10和Cpn60伴侣蛋白在4-12℃表现出较高活性,在ArcticExpress (DE3)细胞中表达时,可降低重组蛋白包涵体的形成,增加可溶重组蛋白的表达量及生物活性,比传统的原核表达伴侣蛋白GroEL、GroES等具有更加优异的促融性能。唯地生物生产的ArcticExpress (DE3)感受态细胞经特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达108cfu/μg DNA。

ArcticExpress (DE3)感受态细胞操作方法

1. ArcticExpress (DE3)感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的质粒,并用手拨打EP管底混匀,冰中静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700 μl不含抗生素的无菌培养基 (LB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。

4. 5000 rpm离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的LB培养基上((平板中务必同时含有40ug/ml的庆大霉素和转化质粒本身的筛选抗生素;若质粒浓度较高,也可稀释后涂板,务必保证能在平板上挑到单克隆菌落)。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。



图片17.png

 

ArcticExpress (DE3)感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。

2. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。除复苏培养基为无抗生素外,其余所用培养基、培养液均应含有40ug/ml的庆大霉素,以防质粒丢失。

3. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

4. ArcticExpress (DE3)感受态细胞具有四环素、庆大霉素抗性,不可用于具有四环素、庆大霉素抗性质粒的转化。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


ArcticExpress (DE3)感受态细胞信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于ArcticExpress (DE3)感受态细胞报价、型号、参数等信息, 欢迎来电或留言咨询。除供应ArcticExpress (DE3)感受态细胞外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供JM110热激感受态细胞、XL1-Blue热激感受态细胞等产品, 公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。

相关试剂 更多

相关产品

当前位置: 仪器信息网 泽叶生物 试剂 ArcticExpress (DE3)感受态细胞

关注

拨打电话

留言咨询