供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 100μl/支 |
货号: | ZY1050 |
CAS号: |
Ar.A4化转感受态细胞
Ar.A4 Chemically Competent Cell
产品规格(CAT#:ZY1050)
Ar.A4: 100μl/支
pK7WGF2(control vector,10ng/μl ) 10μl
保存条件(保质期): -80℃(12个月)
基因型
Agrobacterium rhizogenes(kanR ) Ar A4 Ri(agropine type)
K599 Electro电转感受态细胞产品说明
发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感
染 大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.A4发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,
具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,胡萝卜,甘草等),同时具有卡那霉素抗性。本公司生产的Ar.A4化
学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测,转化效率>104 cfu/μg DNA。
操作方法
1.取-80℃保存的Ar A4发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。
2.每100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高,第一次使用前最好做预实验确定所加质粒的量)
,用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、
冰浴5分钟。
3. 冰浴中拿出放室温,加入700μl 无抗生素的TY 液体培养基,于 28℃振荡培养 2小时。
4. 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取 100 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的 TY平板上,
倒置放于 28℃培养箱培养 2-3 天
注意事项
1. 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转 化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。 2. 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开, 与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。 3. 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获 得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。 4. Ar.A4具有卡那霉素抗性,不可用于具有卡那霉素抗性质粒的转化。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
相关产品
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa, 双色)
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)
Minerva Super Fusion Cloning Kit(无缝克隆试剂盒)
Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖检测试剂盒
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
呋喃西林快速检测卡
呋喃妥因快速检测卡
呋喃它酮快速检测试剂盒
呋喃妥因快速检测试剂盒
呋喃西林快速检测试剂盒
关注
拨打电话
留言咨询