供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 1.5 mL |
货号: | ZY660692-1.5 |
CAS号: |
内毒素清除试剂盒
Endotoxin removing Kit
本试剂盒使用的是一类高效内毒素清除树脂,它以修饰过的多粘菌素B(PMB)为配体,进行特异性的内毒素清除。经此专用亲和介质纯化,样品最终的内毒素水平可低于0.1 EU/mL。
细菌内毒素(脂多糖,LPS)是革兰氏阴性细菌细胞壁的主要成分。人们在研究革兰氏阴性菌血症和内毒素血症的过程中,发现细菌内毒素在其中起着关键的作用,内毒素使机体免疫功能严重受损,进一步的发展可能引发脓毒性休克,弥散性血管内凝血,急性呼吸窘迫综合症,全身炎症反应综合症或致命性多器官功能衰竭。因此,内毒素的清除对于人类疾病治疗的注射型药品、生物制品等都是必须的,尤其对于基因药物、蛋白药物、单抗克隆药物、治疗性疫苗、小分子化学药物等生物制品的下游纯化处理来说就显得非常重要。
试剂盒特点:
1.高稳定性,高去除效率。
2.高结合力:> 2000,000 EU/mL。
3. pH范围为5-10时,亲和介质对内毒素的清除率在92%以上;pH值在7-8时,清除效率最高。
4. 无需恒流泵即可调节流速。
5. 重复使用 5次不会改变柱子效果。
6. 使用方便,试剂盒中提供无热原缓冲液,无热原收集管及无热原枪头等。
7.适合纯化对象为蛋白,多肽,抗体,多糖等。
8.可耐受试剂:20% DMSO,20% 乙醇,20% 甘油;1 M 尿素,300mM咪唑; 0.05% 吐温-20,10mM DTT等。
试剂盒组成:
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1.样品处理:样品的pH值和离子强度在内毒素去除的过程中起着重要作用。虽然结合内毒素的pH范围在6-9,但是7-8的pH范围是纯化的最佳范围。合适的离子浓度可以降低非特异性吸附,0.15-0.5 M NaCl的条件可以得到一个很好的去除效率和低的样品损失。所以,纯化之前可以使用处理过的氯化钠,0.1 M的氢氧化钠或0.1 M盐酸来调节离子强度或pH值。
2.活化亲和介质:将预装柱置于铁架台,垂直固定,去除预装柱顶部的盖子,打开流速控制器,使保护液在重力作用下流干,加入5mL的(预冷)再生缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.25mL/min(或者10滴/min),待再生缓冲液流干,再加入5mL 再生缓冲液,再重复操作两次,确保体系保持无热原(即内毒素)存在。即使是第一次使用也必须进行这一步操作。这步操作大约需要60分钟完成。
3. 平衡亲和介质:活化完毕后,加入6mL的(预冷)平衡缓冲液,调节流速控制器,保持流速在0.5mL/min,流干平衡缓冲液,再按此操作重复两次。这步操作大约需要40分钟完成。
4.内毒素清除:将流速控制器关闭,使用无热原枪头将样品加入,打开控制器,控制流速不高于0.25mL/min,流出液体积达到1.5mL后,使用无热原接收管接受样品,样品流干后,再加入1.5mL-3.0mL的(预冷)平衡缓冲液淋洗,收集淋洗液。检测样品浓度及内毒素水平。
5. 再次使用:如果流出样品内毒素水平未能达到预期值,需要将预装柱重新再生,按照步骤1 重新再生,然后上样纯化。
6. 储存条件:如果预装柱用完后需要保存,先用10mL 平衡缓冲液平衡柱子,待平衡液流干,加入1.5mL的再生缓冲液(含0.02%的叠氮化钠)。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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