供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 10次 |
货号: | ZY60904-10 |
CAS号: |
一站式RNA电泳套装
One-Stop RNA Electrophoresis Pack
本品是包括琼脂糖、去离子甲醛、RNA上样液、电泳液等在内的RNA电泳套装,专门用于RNA电泳分析。可以进行至少10次mini变性胶电泳。
产品特点:
1. 即开即用,用户不需要自己进行RNase 灭活、高压灭菌、pH调节等操作。
2.与Northern杂交等后续反应兼容。
产品组成:
储存条件:常温运输和保存,但收到货后RNAload 需要4℃保存,RNAep,10×一旦打开需要-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
注意:所有器皿(三角瓶,电泳槽,枪头等)均需去除RNase。强烈推荐使用本公司的超强无毒的固相RNase 清除剂。
一、配制琼脂糖甲醛变性胶(1.2%,100mL)
1.在三角瓶中加入下列成份:琼脂糖 1.2-1.5g;DEPC水 87mL
2. 将琼脂糖加热融化后,加入10mL 10×RNAep(10×RNAep 就是10×MOPS缓冲液,其瓶子一旦打开,就很容易产生污染细菌,细菌大量繁殖后会释放大量 RNase,所以剩下的10×RNAep 最好-20℃放置)。
3. 待胶冷却至 60℃左右,再加下列成份:甲醛 3.0mL;自备EB(10mg/mL)2-4μL
注意:由于本试剂盒提供的RNAload中含EB,所以也可以不加EB,但效果较差。如果使用自备的其他染料,如SYBR Green I,则不能同时使用其他染料,包括含EB的RNAload,用户需要另购不含EB的RNAload)。
4. 混匀后倒胶,凝固半小时后即可以使用。
二、配制电泳液
5. 将RNAep 用DEPC 水稀释十倍后即成电泳液,所需要的体积根据使用的电泳槽决定。
三、变性RNA样品
6.在一干净的离心管中将5-10μL RNA和15μL RNAload 混合,50-60℃保温10分钟后冰浴5-10分钟,直接上样。注意:每一泳道至多可分析30μg RNA,通常用10-20μg 总RNA进行Northern杂交,可以检测高丰度mRNA(占mRNA 总量的0.1%以上);如待测RNA含量极微,每个泳道需加0.5-3.0μg poly(A)+ RNA。
四、电泳
7.电泳时,将凝胶预电泳5 min(电压为5 V/cm)。随后加样品和分子量对照(如果有的话),以3-4 V/cm的电压电泳,直至染料迁移至胶下游的3/4处。
8.电泳结束后,在300nm 紫外灯下拍照。
五、后续处理
9. 按标准方法进行Northern杂交等后续处理。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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