PCR级绿如蓝染料,20×

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品牌: 泽叶生物
型号: 0.1 mL
货号: ZY60909-0.1
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核酸扩增.jpg

PCR级绿如蓝染料,20×

DNAgreen, PCR Grade

第二代的非饱和型荧光染料(如SYBR Green I)在高浓度下会抑制荧光PCR,所以反应重复性很不稳定,并且不能用于要求严格的Tm分析。本产品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一样,是第三代饱和型荧光染料,在饱和浓度下也不抑制荧光PCR反应。

产品特点:
1. 饱和浓度不抑制PCR反应,因此得到的荧光信号更强。
2. 抗水解、抗热解和抗光解的能力强于目前最常用的SYBR Green I。
3. 饱和浓度下染料分子没有机会在DNA分子间发生移位,因此荧光强度跟DNA变性程度呈线性关系,可以用于精细的Tm 测定实验,如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 仪器(包括iCycler、LightCycler、ABI 测序仪)兼容。激发和发射光谱跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光学设置参数。
5. 不能渗透进入细胞内,毒性和致突变性远低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲线分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛细管电泳等研究。

储存条件:常温运输、-20℃避光保存,有效期一年。

使用方法:
先将本产品放置在室温融化,然后震荡10秒钟,短暂离心后待用。下面以50μL的标准PCR反应体系为例说明其使用:

1.在一干净的PCR 管中,加入下列成分:

试剂加入量
10×PCR Buffer(No Mg2+)5μl
MgCl2 50mM2.5μl
dNTP 10mM1μl
本产品(PCR级绿如蓝染料)2.5μl
Taq DNA聚合酶1-5U
DNA模板适量
PCR引物5-50 pmol each
补水到50μl


2. 放入荧光PCR 仪中进行qPCR,并在退火或延长反应时记录荧光信号。使用的光学参数可以跟FAM或SYBR Green I 完全一样。

注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系统,需要在Well Inspector选项下的非特异参照中选择“无”;使用LightCycler时,最好在PCR 体系中再加入终浓度为0.5mg/mL的BSA以降低仪器对染料和模板的非特异吸附。
2. 如果使用化学修饰过的Taq DNA聚合酶,可能需要减低KCl的浓度并提高Tris的浓度。


特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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