供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 10次 |
货号: | ZY630308-10 |
CAS号: |
一管式双链cDNA合成试剂盒
One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下:
cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口,再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链,其原理图如下:
产品特点:
1. 即开即用,含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA,对不含poly rA的RNA(如细菌RNA),不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行,第一链cDNA合成后不需要任何处理,直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA,最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。
试剂盒组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂,用户需自备相关试剂。
二:双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中,按下表设置cDNA合成反应:
注:如果不需要将双链cDNA平末端化,则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片,则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常,需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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