供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 50次 |
货号: | ZY60106-50 |
CAS号: |
加T试剂盒
dT Tailing Kit
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dTTP存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴,主要用于制备T载体。其流程图如下:
产品特点:
1. 简单,2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的载体可以作为T载体使用。
产品组成:
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反应前纯化处理:
平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是,用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加T反应时,切除掉加上的T尾巴,干扰反应。
二:加T反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
三:反应后处理
加T反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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