Klenow片段

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品牌: 泽叶生物
规格: 200 U
货号: ZY631015-200
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Klenow片段

Klenow Fragment

Klenow片段是大肠杆菌聚合酶I(E.coli.DNA polymerase I)的大片段(Large Fragment)。来源于大肠杆菌表达,表达基因的来源为polA 基因片段。

Klenow片段保留了DNA聚合酶I的5'→3'聚合酶活性和3'→5'外切酶活性,但缺少完整的Klenow酶的5'→3'外切酶活性。Klenow Fragment的3'→5'外切酶活性保证了其合成DNA时的准确性(proofreading)。

特点:对于5'突出或3'突出的粘末端都可以催化产生平末端,用于后续的平端连接。

用途:双链DNA 5'突出(5'overhang)末端的补平(fill-in);双链DNA 3'突出(3'overhang)的打平(也称削平);5'突出末端的标记;随机引物法进行DNA标记;Sanger双脱氧法进行DNA测序;cDNA第二链的合成或定点突变反应第二链的合成。

分子量:约68kDa(单体)。

活性定义:37℃30分钟时间内,催化10nmol脱氧核糖核苷酸(dNTPs)摻入到多聚核苷酸中所需的酶量定义为1个活性单位。

酶活性检测条件:67mM potassium phosphate(pH7.4),6.7mM MgCl2,1mM 2-mercaptoethanol,0.033mM dATP,0.033mM dTTP,0.4MBq/ml[3H]-dTTP,62.5μg/ml poly(dA-dT)·poly(dA-dT)。

纯度:不含DNA内切酶,不含RNase。

酶储存溶液:25mM Tris-HCl(pH7.5),0.1mM EDTA,1mM DTT,50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X):500mM Tris-HCl(pH8.0 at 25℃),50mM MgCl2,10mM DTT。

储存条件:-20℃



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