pTRE2hyg

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空载体与空质粒的区别

载体包括质粒、噬菌体之类很多。

空载体是没有插入外源基因的载体

空质粒是没有插入外源基因的质粒，所以可以说空质粒是空载体，但空载体不一定是空质粒。 

pTRE2hyg方法:用重组质粒(PLNCX-RI)转化DH5-α感受态细菌,成功转化后以SDS碱裂解法大量制备纯化质粒DNA,同法处理空质粒载体(PLNCX)。通过琼脂糖电泳、紫外分光光度法鉴定R1基因提取的纯度和浓度。 

一、载体与质粒的区别

1.载体（Vector）的概念

把一个目的基因通过基因工程手段送到生物细胞（受体细胞），需要运载工具（交通工具）携带外源基因进入受体细胞，这种运载工具就叫做载体（vector）。 

基因工程上所用的载体是一类能自我复制的DNA分子，其中的一段DNA被切除而不影响其复制，可用以置换或插入外源(目的) DNA而将目的DNA带入宿主细胞。常用的载体有质粒、噬菌体、病毒等。

2.质粒（Plasmid）的概念

质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。质粒常见于原核细菌和真菌中，绝大多数的质粒是DNA型的，少部分为RNA型。天然DNA质粒大都具有共价、封闭、环状的分子结构，其分子量范围：1-300 kb。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。 

pTRE2hyg质粒的基本特征：

质粒的自主复制性：质粒能利用寄主细胞的DNA复制系统进行自主复制，其DNA上的复制子结构决定了质粒与寄主的对应关系，并根据在每个细胞中的分子数（拷贝数）多寡，质粒可分为两大复制类型： 

严紧型复制控制的质粒 1 - 3 拷贝

松弛型复制控制的质粒 10 - 60 拷贝 

启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号

启动子－促进 DNA 转录的 DNA 序列，这个 DNA 区域常在基因或操纵子编码序列的上游，是 DNA 分子上可以与 RNApol 特异性结合并使之开始转录的部位，但启动子本身不被转录。

增强子/沉默子－为真核基因组（包括真核病毒基因组）中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。

核糖体结合位点/起始密码/SD 序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA 有核糖体的两个结合位点，对于原核而言是 AUG（起始密码）和 SD 序列。

转录终止序列（终止子）/翻译终止密码子：结构基因的一个外显子中有一个 AATAAA的保守序列，此位点 down－stream 有一段 GT 或 T 富丰区，这2部分共同构成 poly（A）加尾信号。结构基因的一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列，此位点 down－stream 有一段GT 或 T 富丰区，这2部分共同构成 poly（A）加尾信号。

如何选择pTRE2hyg质粒载体

选择载体主要依据构建的目的，同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目的是要表达一个特定的基因，则要选择合适的表达载体。载体选择主要考虑下述3点：

1.构建DNA重组体的目的，克隆扩增/表达，选择合适的克隆载体/表达载体。

2.考虑载体的类型：

3.载体MCS中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异，适应目的基因与载体易于链接，不产生阅读框架错位。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！