pTRE2hyg

报价:¥990
供货周期: 现货
品牌: 泽叶生物
型号: 2ug
货号: ZY-64483
上海泽叶生物科技有限公司
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产品详情

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pTRE2hyg

名称             编号    规格    价格

pTRE2hyg           ZY-64483   2μg      990

英文名称:

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保存:-20°C

有效期:两年

货期:现货

其他:

多克隆位点经测序验证

产品介绍:

空载体与空质粒的区别

载体包括质粒、噬菌体之类很多。

空载体是没有插入外源基因的载体

空质粒是没有插入外源基因的质粒,所以可以说空质粒是空载体,但空载体不一定是空质粒。 

pTRE2hyg方法:用重组质粒(PLNCX-RI)转化DH5-α感受态细菌,成功转化后以SDS碱裂解法大量制备纯化质粒DNA,同法处理空质粒载体(PLNCX)。通过琼脂糖电泳、紫外分光光度法鉴定R1基因提取的纯度和浓度。 

一、载体与质粒的区别

1.载体(Vector)的概念

把一个目的基因通过基因工程手段送到生物细胞(受体细胞),需要运载工具(交通工具)携带外源基因进入受体细胞,这种运载工具就叫做载体(vector)。 

基因工程上所用的载体是一类能自我复制的DNA分子,其中的一段DNA被切除而不影响其复制,可用以置换或插入外源(目的) DNA而将目的DNA带入宿主细胞。常用的载体有质粒、噬菌体、病毒等。

2.质粒(Plasmid)的概念

质粒是生物细胞内固有的、能独立于寄主染色体而自主复制、并被稳定遗传的一类核酸分子。质粒常见于原核细菌和真菌中,绝大多数的质粒是DNA型的,少部分为RNA型。天然DNA质粒大都具有共价、封闭、环状的分子结构,其分子量范围:1-300 kb。细菌质粒是基因工程中最常用的载体。 

pTRE2hyg质粒的基本特征:

质粒的自主复制性:质粒能利用寄主细胞的DNA复制系统进行自主复制,其DNA上的复制子结构决定了质粒与寄主的对应关系,并根据在每个细胞中的分子数(拷贝数)多寡,质粒可分为两大复制类型: 

严紧型复制控制的质粒 1 - 3 拷贝

松弛型复制控制的质粒 10 - 60 拷贝 

启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号

启动子-促进 DNA 转录的 DNA 序列,这个 DNA 区域常在基因或操纵子编码序列的上游,是 DNA 分子上可以与 RNApol 特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。

增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。

核糖体结合位点/起始密码/SD 序列(Rbs/AGU/SDs):mRNA 有核糖体的两个结合位点,对于原核而言是 AUG(起始密码)和 SD 序列。

转录终止序列(终止子)/翻译终止密码子:结构基因的一个外显子中有一个 AATAAA的保守序列,此位点 downstream 有一段 GT  T 富丰区,这2部分共同构成 polyA)加尾信号。结构基因的一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列,此位点 downstream 有一段GT  T 富丰区,这2部分共同构成 polyA)加尾信号。

如何选择pTRE2hyg质粒载体

选择载体主要依据构建的目的,同时要考虑载体中应有合适的限制酶切位点。如果构建的目的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体。载体选择主要考虑下述3点:

1.构建DNA重组体的目的,克隆扩增/表达,选择合适的克隆载体/表达载体。

2.考虑载体的类型:

3.载体MCS中的酶切位点数与组成方向因载体不同而异,适应目的基因与载体易于链接,不产生阅读框架错位。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!



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