Mouse--免疫组化试剂盒（HRP-Polymer）

Mouse--免疫组化试剂盒（HRP-Polymer）

产品简介

（HRP-Polymer）免疫组化试剂盒（Mouse）是高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上，形成超大分子抗体-酶聚合物，替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力，同时有很强的组织细胞渗透力，特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单，快速，高敏感，低背景等特点。

自备试剂及耗材：

1.  防脱玻片

2.  PBS（pH7.2-7.6）（货号：WB6018/WB6019）

3.  EDTA抗原修复液（货号：WH1034）或枸橼酸盐缓冲液（货号：WH2007）

4.  内源性过氧化物酶阻断剂（WH1028/WH1029）

使用方法:

石蜡切片热修复抗原染色程序:

1、制备切片，常规脱蜡至水。

2、3%H2O2,室温10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗2 分钟×3 次。

3、根据抗原抗体情况，必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。

4、滴加封闭液,室温10分钟。甩去多余液体, 不洗。

5、滴加适当稀释的一抗（小鼠IgG），20-37 ℃1~2 小时或4℃过夜。0.01M PBS 洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）

6、滴加聚合HRP 标记抗小鼠IgG，37℃孵育30 分钟，PBS 或TBS 冲洗，2 分钟×3 次。

7、DAB 显色:取1ml 蒸馏水,加试剂盒中A,B,C 试剂各1 滴,混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般5-30 分钟。蒸馏水洗涤。

8、 苏木素轻度复染、脱水,透明,封片、观察。

B.血涂片，细胞和冰冻切片染色程序

1.载玻片经防脱片剂处理（Poly-L-Lysine）。抗凝血经分层离心后涂片；培养细胞也可涂片或贴片生长；冰冻切片室温风扇吹干。

2.固定方案用4%多聚甲醛或丙酮固定10-20 分钟。

3.30%H2O2 1 份+纯甲醇50 份混合,室温浸泡30 分钟，以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗1-2 次。

其余步骤和石蜡切片3-8 步相同。

如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复，步骤和石蜡切片3-8 步相同

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！