供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 500 μL |
货号: | ZY-64L033 |
CAS号: |
GelGreen 核酸染料(500μL in water, 10,000 X)
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
GelGreen 核酸染料(10,000 × in water) | ZY-64L033 | 500 μL | 550 |
产品描述
GelGreen是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有独特设计的荧光染料,荧光信号强度与双链DNA的数量相关,与溴化乙锭(EB)有相同的光谱特性,使用观察EB的普通紫外凝胶透射仪观察即可,染色后的DNA条带在蓝光透射下呈现绿色荧光。这种新型染料具有不能穿透细胞膜、与双链DNA的结合力非常强,基因诱变性低,热稳定性高,对分子生物学中常用的酶没有抑制作用及适用范围广等优点,得到了市场的广泛认可。该产品适用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的dsDNA、ssDNA及RNA染色。
运输与保存
常温运输。常温保存,有效期99个月。
使用方法
1.胶染法(使用方法同EB,电泳前胶染色)
(1)制胶时按1:10000比例加入GelGreen核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL GelGreen 10,000×储液)。由于GelGreen具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶。
(2)按照常规方法进行电泳。
2.泡染法(电泳后胶染色)
(1)按照常规方法进行电泳后,将凝胶小心地放入合适的容器中,缓慢加入足量的3×染色液(用0.1 M NaCl 溶液稀释GelGreen染液3300倍形成3×染色液,如将15 μL GelGreen 10,000×储液加入到50 mL 0.1 M NaCl 溶液,该染色液可重复使用3次,4℃(室温)避光保存1周)浸没凝胶。
(2)室温振荡染色30 min左右,轻轻摇晃,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。
3.预染法(最省染料的染色方法,电泳前待测样品染色)
(1)该方法适用于琼脂糖凝胶电泳和PAGE凝胶电泳。
(2)工作液的配制:用电泳缓冲液将10000×的GelGreen原液稀释1000倍,即为10×GelGreen工作液。GelGreen工作液可以置2-8℃冷藏一个月以上。
(3)制胶:按常规方法制胶,不含任何染料。
(4)待测样品染色:向分析样品中加入GelGreen工作液和载样缓冲液,使GelGreen工作液的终浓度为
1×,室温放置10 min,使GelGreen与样品中DNA充分结合。
(5)DNA Marker染色:将5 μL DNA Marker和1 μLGelGreen工作液混匀,室温放置5 min,使GelGreen与DNA充分结合。
(6)上样、电泳:按常规操作。
注意事项
1. 本产品仅限于科学实验研究使用,不得用于临床诊断、治疗等领域。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,GelGreen 可以全部从双链核酸上去掉。
3. 如果想对用 GelGreen 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%~ 0.3% 的SDS。
4. 为了避免染料对核酸迁移的影响,推荐使用泡染法进行染色。
5. GelGreen对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
6. GelGreen原液在室温保存,如放置冰箱保存会产生部分沉淀,使用前适当加热并摇匀即可正常使用。
7. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度、延长凝胶时间以保证边缘清晰、改进上样技巧或选择泡染法染色。
特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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