供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
规格: | 20T |
货号: | ZY-65L412 |
CAS号: |
Quick Cell 外泌体提取试剂盒(细胞上清专用)
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Quick Cell 外泌体提取试剂盒(细胞上清专用) | ZY-65L412 | 20T | 4700 |
产品描述
外泌体(exosome)是由细胞特异性分泌的包含RNA和蛋白质的小囊泡(30-150 nm),在血液、唾液、尿液及乳汁等体液中大量存在。外泌体被认为具有细胞间信使的功能,参与细胞间的通讯。然而关于它的分泌和摄取及其组成、“运载物”及相应功能的精确分子机制目前尚不明晰。
外泌体的生物学功能研究中需要分离完整的外泌体颗粒,而传统超速离心方法步骤繁琐、硬件要求高、操作难度大。自主开发的外泌体快速提取试剂盒,经过优化处理,适用于细胞培养上清液(尿液等)中的外泌体提取,并搭配纯化过滤装置,可快速高效地获得高纯度外泌体颗粒, 可用于电镜分析、NTA粒径分析、核酸分析、蛋白分析、细胞学实验和动物实验等。
产品组成
组分名称 | 规格 | 货号 |
外泌体浓缩试剂(ECS) | 100 mL | AC15L412-1 |
外泌体纯化滤器(EPF) | 2.0 mL (20 Tubes) | AC15L412-2 |
*RNase/DNase Free, Sterile |
保存方法
常温运输,常温保存,保质期24个月,使用前请充分混匀。
使用方法
一、样品预处理
1. 取样:如果是冻存样品,从冰箱取出后于25℃水浴中进行解冻,将完全融化后的样品置于冰上;如果是新鲜样品,收集样品后置于冰上。
2. 样品初始用量:对于细胞上清样品,单次提取时的样品量最低为20 mL。
3. 离心去除细胞碎片:将样品转移至离心管中,4℃,3000×g离心10 min,取上清转移到新离心管中。
二、提取外泌体
1. 上清液预处理:在去除杂质的离心上清液中加入外泌体浓缩试剂(ECS),加入ECS的量与细胞上清液的体积比为1: 4.即若细胞上清液液体积是20 mL,则ESC的量为5 mL。
2. 溶液混合:加入ECS试剂后将离心管盖紧,通过涡旋振荡器混匀1 min,再放置于2℃至8℃静置2 h。
3. 沉淀外泌体:取出装有混合液的离心管,4℃以10000×g离心60 min,弃上清,沉淀中富含外泌体颗粒。【注】:尽可能吸净上清液。
4. 外泌体重悬:取100 μL 1×PBS均匀吹打离心沉淀物,待其均匀悬浮在PBS中后,将重悬液转移至新的1.5 mL离心管中。
5. 收获外泌体颗粒:将含有重悬液的1.5 mL离心管,4℃以12000×g离心2 min,保留上清液,该上清液中富含外泌体颗粒。
三、纯化外泌体
1. 纯化外泌体:将收获的外泌体颗粒粗品转入外泌体纯化滤器(EPF)上室中,4℃,3000×g离心10 min,离心后收集EPF柱管底的液体,此液体即为纯化后的外泌体颗粒。
2. 外泌体的保存:纯化后的外泌体以保存于-80℃低温冰箱中,以备后继实验使用。
注意事项
1. 对于待测样品粘度过大时,可将样本用4℃预冷的1×PBS缓冲液进行等体积稀释处理。
2. 当血清样品收获的外泌体浓度较高,收获的外泌体颗粒无法通过EPF柱纯化时,可用4℃预冷的1×PBS进行稀释后再通过EPF柱离心。
3. 针对外泌体标志蛋白(CD 63, CD 9, CD 81等)进行Western blot检测,可以鉴定所提的外泌体
4. 多数情况下,细胞在体外培养需要血清,但血清中含有外泌体,为了去除血清的外泌体,可以通过100000×g超速离心过夜,去除血清外泌体或者可选择无血清培养基进行培养。
5. 在收获细胞时,应确定死亡细胞占所有细胞5%以下。细胞死亡过程中会释放大量大小不等的囊泡,细胞最终会裂成碎片,它们在外泌体的纯化过程中会污染活细胞产生的外泌体,影响外泌体的提取。
特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
相关产品
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
Super GelBlueTM 核酸染料, 10,000× in water
彩色预染蛋白Marker(10-180 kDa,三色)
彩色预染蛋白Marker(10-250kDa, 双色)
琼脂糖 A2015
Super ECL Plus(超敏化学发光检测试剂盒)
PAGE 彩色快速凝胶制备试剂盒(10%)
Minerva Super Fusion Cloning Kit(无缝克隆试剂盒)
Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖检测试剂盒
FITC-Annexin V/PI 细胞凋亡试剂盒
呋喃西林快速检测卡
呋喃妥因快速检测卡
呋喃它酮快速检测试剂盒
呋喃妥因快速检测试剂盒
呋喃西林快速检测试剂盒
关注
拨打电话
留言咨询