供货周期: | 现货 |
品牌: | 泽叶生物 |
型号: | 5 mL(20mM) |
货号: | ZY-62L011 |
Hoechst 33258 *超级纯*
订购信息
产品名称 | 货号 | 规格 | 价格 |
Hoechst 33258 *超级纯* | ZY-62L011 | 5 mL(20mM) | 1140 |
产品描述
Hoechst 33258是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低,在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 33258为特异性DNA染料,与A-T键结合,这种染料对死细胞或经70%冷乙醇固定的细胞可立即染色。而活细胞的着色是渐进性的,在10 min内可达饱和。在荧光显微镜下,活细胞核呈弥散均匀荧光,出现细胞凋亡时,细胞核或细胞质内可见浓染致密的颗粒块状荧光。Hoechst 33258常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核和线粒体的显像观察。
Hoechst经常用来代替其它核酸染料如DAPI,这两种染料关键的不同点在于,与DAPI相比,Hoechst 33258具有更强的亲脂性,因此能更好的透过完整的细胞膜。用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5~10 μg/mL。
保存方法
冰袋(wet ice)运输,-20℃干燥避光保存,保质期12个月。
技术参数
光学性质:Ex(nm):352 Em(nm):461
化学参数:分子量:533.88 溶剂:Water CAS:23491-45-4
使用方法
1. 缓冲液制备。用PBS或合适的缓冲液制备10~50μM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色。
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色,和Hoechst33258染色。如果不进行免疫荧光染色,则直接按步骤进行Hoechst33258染色。
(1)对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3~5 min。
(2)吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2~3次,每次3~5 min。
(3)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
3. 活细胞或组织染色
(1)细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液,对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。
(2)在37℃培养细胞10~20分钟。
(3)用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
(4)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm,发射波长460 nm。
注意事项
1. Hoechst 33258溶于水,溶解度可达20mM(约10mg/ml)。您也可直接购买20mM的液体规格产品(货号:AC12L011)。
2. Hoechst 33258对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
4. 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
特别提示:本公司的所有产品仅用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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