大肠菌群、金黄色葡萄球菌检验中常见问题分析!
一、大肠菌群
大肠菌群:是只一群能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏无芽孢杆菌 。该菌主要来源于人畜粪便。
检测该菌的方法主要有MPN法,平板计数法。
MPN法中主要用到的是LST、BGLB、EC肉汤等。
平板计数法主要用DC、VRBA等。
在检测该菌时易出现的问题:
1、LST、BGLB、EC等在灭菌时小倒管中气泡排不尽。
2、气泡不易观察。
3、VRBA、DC平板上菌落特征不易辨认。
原因:
1、在分装LST、BGLB、EC时,小倒管中有水柱;此外,高压灭菌时,需急排气,灭菌后迅速冷却。
2、观察气泡时,要对光倾斜试管,使小倒管紧贴在试管壁上,便于观察。
3、熟悉大肠杆、大肠菌群在上述平板上的特征,必要可做一些阳性的对照。有些食物残渣会影响观察结果,这样需要我们在培养前仔细观察平板的状态,大的食物残渣可以做一些标记。
二、金黄色葡萄球菌
金黄色葡萄球菌:是人类化脓感染中最常见的病原菌,可引起局部化脓感染,也可引起肺炎、败血症等,其毒性的强弱取决于产生的毒素和侵袭性酶,例溶血素酶、杀白细胞素、血浆凝固酶、脱氧核糖核酸酶。
B-P琼脂上金黄色葡萄球菌有黑色的菌落中心,周围有半透明的卵磷脂沉淀环。
甘露醇卵黄琼脂上的特征是菌落黄色,周围也有卵磷脂沉淀环。
甘露醇高盐琼脂上的菌落特征与甘露醇卵黄琼脂上的菌落特征相同,不过,菌落周围没有卵磷脂沉淀环。
金黄色葡萄球菌在B-P上的菌落特征
检样中常见的问题:
1、平板的状态:透明、有絮状物。
2、凝固酶实验的观察。
原因:
1、不同的厂家的培养基平板制好后的状态有所不同,主要取决于亚碲酸钾卵黄增菌液的不同。我们公司采用的鸡蛋是山鸡蛋,卵磷脂含量较高,因此制备好的平板一般透明度较好,接种金黄色葡萄球菌后,菌落特征较易观察。
2、在添加亚碲酸钾卵黄增菌液时,温度的掌握,不宜太高,过高易使卵黄变性,也不应太低,太低琼脂易凝固。
3、将金黄色葡萄球菌接种到兔血浆上后,每半小时观察一次,观察凝固时,将血浆轻轻倾斜或慢慢倒置,如有流动,既证明没有凝固。如若不明显,可补做DNA酶实验。
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