细胞培养基的常见成分及功能介绍!
中国微生物菌种查询网:任何做过哺乳动物细胞培养的人都知道典型的细胞培养基配方:1瓶DMEM,10%的血清,其他一些成分,混合一起用于培养细胞,保持其活力。那么,这些成分分别都有什么功能呢?
一、能量来源
每一个生长培养基都需要碳源,以供细胞新陈代谢。碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖类,如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸,谷氨酰胺)。葡萄糖通常以终浓度为5.5 mM的含量添加,大约等于人体血液中的葡萄糖水平。然而,你可以购买葡萄糖浓度变化范围很广的培养基来满足你的具体需求。你甚至可以购买不含葡萄糖的培养基,然后自己定制浓度,模拟高糖的糖尿病状况,或者研究低糖应激反应。
二、缓冲液
细胞需要一种特殊的pH值从7.2到7.4,否则它们无法z好地发挥细胞功能,以供生长和存活。在二氧化碳含量较高的培养器中,二氧化碳与水发生反应,产生氢离子,使培养基酸化。为了中和二氧化碳产生的酸度,并在培养基中保持z佳pH值,大多数培养基都使用化学缓冲系统。然而,一些缓冲方法会干扰细胞生长。
哺乳动物细胞最常见的缓冲系统是碳酸氢钠,生物影响z小。碳酸氢钠与氢离子反应生成二氧化碳,隔离它们以保持pH值。然而,碳酸氢钠的一个缺点是,它在生理pH值上不是z佳的缓冲效果。为了避免这个问题,研究人员经常使用替代品,如HEPES,增加某些培养基类型的缓冲能力。
三、酚红
由于维持pH值对细胞培养至关重要,许多培养基配方包括一种名为酚红的pH指示剂,其在酸性条件下变黄(< 6.8),在基本条件下呈粉红色(> 8.2)。虽然通常不是问题,但酚红可以模拟雌激素,因此,当培养表达雌激素受体的细胞类型时,通常被排除在外。没有酚红的培养基可以用于比色测定,如MTT细胞增殖实验,苯酚的色谱可能会干扰光谱光度测量的读数,从而使结果混淆。
四、血清
对许多培养体系来说,一个重要组成部分是血清,通常是胎牛血清,称为FBS。血清来自于血液,是糖、盐、脂类、生长因子等许多成分的混合物。由于它的生物来源,很难维持再生性,因为每一批血清都是duyiwuer的。为了规避这一问题,一些实验室使用化学定义的血清替换物,一些实验室则购买一整批次的特定的血清,以确保一致的结果。
五、代谢物,维生素和矿物质
DMEM的成分列表主要分为三大类:氨基酸、维生素/辅因子和无机盐(包括钙和镁)。许多这些成分在所有细胞培养基中都是常见的,而精确的组合和浓度已经对细胞生长进行了优化。尽管如此,许多实验室还是选择用额外的非必需氨基酸补充他们的培养基,以防止细胞使用葡萄糖或谷氨酰胺来合成。此外,一些公司生产无镁和钙的培养基用于特定的研究,选择时请仔细查看。
六、抗生素
很多实验室都在他们的细胞培养中加入抗生素,以防止不需要的细菌或真菌的生长,即使是无菌工作。最常用的抗菌补充剂是青霉素和链霉素(pen / strep)的组合,在完整细胞培养基中,终浓度为青霉素50-100 IU/ mL和链霉素50 -100 g/ mL。然而,一些实验室选择不使用抗生素,因为抗生素会对细胞产生不必要的影响,或者可以掩盖低水平的细菌污染。根据需要,你可以决定是否在培养基中使用抗生素。
IM-9 (人外周血B淋巴细胞)的转化方法与实验步骤!
帕氏食氢产水菌的形态特征与实验内容及使用范围!
ATCC 27340 延长布劳特氏菌的培养方法与操作步骤!
免疫细胞临床与免疫细胞疗法:未来医学的新方法!
相关产品
沙门氏菌生化鉴定试剂盒(GB)
安洁清4号实验室玻璃器皿专用洗涤剂
Hymenobacter fastidiosus
Conexibacter woesei
Conchiformibius steedae
Conchiformibius kuhniae
Companilactobacillus zhongbaensis
Companilactobacillus versmoldensis
Companilactobacillus tucceti
Companilactobacillus suantsaicola
Companilactobacillus paralimentarius
Companilactobacillus pabuli
Desulfobacter hydrogenophilus
Desulfobacter latus
Desulfobacterium autotrophicum
关注
拨打电话
留言咨询