药用真菌的菌种保藏方法!
百欧博伟生物:菌种保藏可以保持优良菌种的生活力和遗传性状,降低菌种的衰亡程度,确保菌种为纯培养,防止杂菌和螨类的污染。下面小编主要为大家介绍一下药用真菌的菌种保藏方法。
1、菌种的保藏方法
菌种保藏的原理是利用干燥、低温和缺氧等环境条件降低孢子或菌丝的代谢活动,扼制其繁殖,减少其变异,使之处于休眠状态达到保持菌种原有优良性状的目的。常见的菌种保藏方法有琼脂斜面低温保藏法、石蜡油保藏法、沙土管保藏法、孢子滤纸条保藏法、冷冻低温保藏法、超低温液氮保藏法等。菌种的长期保藏最好由专门的药用真菌研究或菌种保藏机构进行。
2、菌种的退化、老化及复壮措施
(1)菌种的退化、老化:在药用真菌菌种传代过程中,常常会出现长势弱、出菇迟、产量低、质量差等现象,原来优良的性状渐渐消失,这是由于菌种的老化或退化造成的。菌种的老化主要是由于养分等外界条件的恶化所造成的,不具有遗传性。菌种退化的本质是染色体的变异,具有遗传性。可以根据不同菌种的特性及其种性老化、退化的原因,采取一系列的相应措施,进行菌种的提纯复壮,以保证菌种的优良种性。
(2)防止退化、老化措施:一旦菌株出现了异常现象,首先要分清是老化还是退化,采取相应的防止菌种退化、老化的措施:
①减少扩接:控制菌种移接次数。当获得优良菌种后,转管扩接z多不要超过5次。
②防止基因突变:低温保藏菌种,一般宜在0~4℃。目前国内、外为防止菌种退化,均采用液态氨在超低温条件下保藏。
③分离纯化:对保藏的优质菌种需要经常分离纯化,一般每次出菇后,都应挑选符合本品种特征的优良子实体进行组织分离,每年进行一次孢子分离,并经出菇鉴定后,选择性状优良者再进行组织分离。
④菌种复壮:当某一菌种因环境条件不适宜、生长发育不良时,给予适宜的条件,菌丝会比原来长得旺盛,就叫复壮。复壮的措施很多,如选择该菌种适合的培养基、培养温度、环境、pH值、防止杂菌污染及避免多品种混合栽培等。
⑤活化移植:菌种在保藏期间,通常每隔3~4个月要重新移植1次,并放在适宜的温度下培养1周左右,待菌丝基本布满斜面后,再用低温保藏。但应在培养基中添加磷酸二氢钾等盐类,使培养基pH变化不大。
⑥更新养分:连续使用同一种木屑培养基,会引起菌种退化,应注意变换不同树种和配方比例的培养基。也可在配制中添加VE,制作斜面培养基,可增强菌种新的生活力,促进良性复壮。
⑦改善环境:在制种过程中,应创造适宜的温度,并注意通风换气,保持室内干燥,使其在适宜的生态条件下生长,保持性状稳定。
⑧保证菌种的纯培养:不用被杂菌污染的菌种,不要用同一个药用真菌种类的不同菌株混合或近距离相连接培养。
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