微生物操作常用的接种工具!
一、无菌室(接种室)或接种箱
要培养微生物,首先就需要接种,而接种必须在无菌条件下进行。这就需要建造无菌室或接种箱,为接种创造必要的条件。
无菌室可以建在实验室内,作为实验室的一个小套间。面积为4~5平方米,高2.5米左右。无菌室外应连接一个小缓冲间,面积为2平方米左右。缓冲间和无菌室的门不要建在同一条直线上,以减少空气中杂菌进入无菌室。
无菌室和缓冲间应作到清洁、密闭性好,室内最好有换气设备,以便在工作结束后更换室内空气。两个房间中应各安装l盏30瓦紫外线灯管和照明用的日光灯,无菌室的紫外线灯应悬吊在工作台的正上方,距台面1米,以发挥最大的消毒功能。无菌室内的工作台等用具用品,应经常保持清洁,避免杂菌污染。
如果没有条件建造无菌室,可以用接种箱代替。接种箱结构简单,容易制作,其正面安装玻璃,便于观察。箱前方开两个圆洞各接连1只套袖,操作时将两臂从套袖伸入箱内进行操作。箱内也应悬吊一盏紫外线杀菌灯和一盏日光灯。
二、移液器
用来移取一定量的液体进行接种,主要由按钮、活塞、弹簧和可以装卸的吸头组成。规格有10uL、20uL、100uL、1000uL、5mL、10mL等,可用定量吸取液体,吸头为一次性用品,使用方便。
移液器有固定量程移液器和可调量程移液器。固定量程移液器可移取的体积是固定的,通常功能简单,价格比较便宜。可调量程移液器可在容量范围内移取任意体积的液体,通常较复杂,价格比较高。实验人员可以根据日常工作的需要选用集中不同规格的合适的移液器。另外,还有可高压灭菌的移液器和多通道移液器等特殊用途的移液器可供选择。
移液器需要定期送至仪器检测部门进行校准,并在移液器显著位置贴上校准合格标签及校准有效期限。除了送检校准外,平时实验室也应定期对移液器进行自校。自校方法如下:取适量无菌无杂质的优质蒸馏水至于4℃恒温冰箱内24h。打开精密电子天平(精度为0.01g以上),放置一无菌无杂质的小烧杯,重新归零。待精密电子天平的0值稳定后,将移液器调至一数值(如:1mL、5mL等)吸取4℃的蒸馏水加入小烧杯内(纯水在4℃时密度最大,此时1mL纯水质量为1g)。观察电子天平显示的质量数值是否与加入的纯水体积一致(如:吸1mL纯水质量是否显示1.00g,依次类推)。
三、接种针
用来穿刺接种或挑去单个菌落进行平板划线,最早用白金丝制作,先多用镍铬合金丝制成,接种针是一段长8cm,笔直的细丝,固定在长约20cm的金属柄上。
四、接种环
用来进行液体和划线接种,接种针的一段紧紧缠绕在直径约2mm的圆棒(如:枪头尖、牙签等)上,是顶部成为一个圆环,从 根部剪断稍短的一段镍铬丝、使圆环环闭无交叉,调整圆环,使圆环的圆心和根部镍铬丝在同一直线上,在圆环根部大约5mm处折成160°~170°的夹角,制好的镍铬丝环插至接种棒上。
五、接种圈
用来移植砂土管中的菌种,在接种针的顶端卷起几圈呈盘状的环。
六、接种钩
用来接种霉菌和放线菌或蘸取微小菌落的培养物,将接种针的顶端弯成一遍长约3mm的直角。
七、涂布器
用来进行菌落计数或菌种分离。在火焰上将长20cm、直径3mm~4mm的玻璃棒的一段弯成3cm的等边三角形,再使三角形平面与柄成140°角,便于操作。
八、移液管
用来稀释菌悬液及液体接种。上端过滤棉花,有0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、5mL、10mL等规格。
九、滴管
用来进行液体接种的。一般为一次性的塑料滴管。
十、其它
不便使用酒精灯的地方可以使用一次性塑料接种针(环)。一次性接种针(环)采用高分子材料聚丙烯(PP)制成,柔软而富有弹性,表面经过特殊处理后具有亲水性。接种环的规格按直径一般分1.0uL和10.0uL。
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