SW 1353人软骨肉瘤细胞的应用!
一、背景
SW 1353人软骨肉瘤细胞最初从一位72岁女性白人的右肱骨原发性Ⅱ级软骨肉瘤中分离得到。最初的培养基是含有可的松和胰岛素的L-15培养基添加10%FBS和1%抗生素。1982年1月,ATCC收到1支传代至12代的冻存管SW 1353细胞。
软骨肉瘤是常见的恶性骨肿瘤之一,发生于髓腔者为中心型,发生于骨膜者为骨膜型,另有少数可发生于软组织。肿瘤好发于四肢长骨与骨盆,也可见于椎骨、骶骨、锁骨、肩胛骨和足骨。SW1353软骨细胞系是一种人软骨肉瘤细胞株,常被用于软骨细胞功能及相关疾病的研究。
二、细胞处理方法
1、细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输,获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒,然后在超净台中操作。
2、如细胞生长至70%-80%,将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用,保留5-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后,按要求消化传代。
3、弃去培养基,用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次,加入适量胰蛋白酶消化(EDTA胰酶),待细胞完全脱壁后加培养基吹打混匀,分瓶培养。
三、应用
用于人软骨肉瘤细胞SW1353及WISP3突变型C20/A4软骨细胞的Ⅱ型胶原动力学及定位研究:
与许多组织细胞不同,软骨细胞在体外长期贴壁培养(单层培养)和传代过程中,细胞形态与功能可发生显著变化,细胞逐渐丧失合成Ⅱ型胶原和硫酸软骨素蛋白多糖的能力,转而分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原,该变化被称为“软骨细胞的去分化(Dedifferentiation)现象”。从软骨细胞脱离组织,在贴壁条件下培养开始,软骨细胞即逐渐地发生去分化。近10余年来,因海藻酸钠三维培养体系能很好模拟体内环境,有效维持软骨细胞的分化表型,广泛应用于软骨细胞组织工程和软骨细胞生物学研究。
比较了单层培养及海藻酸钠三维培养的人软骨肉瘤细胞SW1353的形态学和表型差异,其目的是观察SW1353细胞在两种培养体系中的表型差异。单层培养的SW1353细胞8周后有去分化改变,而海藻酸钠三维培养体系8周后仍能很好维持软骨细胞的固有表型。与单层培养相比,三维培养中的SW1353细胞增殖缓慢,Ⅱ型胶原合成和分泌低下,因而细胞的这种“休眠”状态可能是三维培养状态下软骨细胞维持其固有表型。
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