微生物检测无菌室消毒灭菌操作要领与方法!
一、目的
建立无菌室清洁消毒标准操作规程,为质检中心的无菌室清洁消毒操作提供标准,防止污染,保证药品质量控制及检验的准确性和真实性。
二、范围
适用于实验室的无菌室的清洁消毒工作。质检中心无菌室的工作人员对本规程实施负责,质保部负责监督。
三、消毒灭菌操作要领
1、先进行无菌室空间的消毒,开启紫外灯30—60分钟。
2、检验用的有关器材, 搬入无菌室前必须分别进会灭菌消毒。
3、操作人员必须将手清洗消毒,穿戴好无菌工作衣、帽和鞋,才能进入无菌室。
4、进入无菌室后再一次消毒手部,然后才进行检验操作。
四、操作过程注意事项
1、动作要轻,不能太快,以免搅动空气增加污染;玻璃器皿也应轻取轻放,以免破损污染环境。
2、操作应在近火焰区进行。
3、接种环、接种针等金属器材使用前后均需灼烧,灼烧时先通过内焰,使残物烘干后再灼烧灭菌。
4、使用吸管时,切勿用嘴直接吸、吹吸管,而必须用洗耳球操作。
5、观察平板时不好 开盖,如欲沾取菌落检查时,必需靠近火焰区操作,平皿盖也不能 大开,而是上下盖适当开缝。
6、进行可疑致病菌涂片染色时,应使用夹子夹持玻片,切勿用手 直接拿玻片,以免造成污染,用过的玻片也应置于消毒液中浸泡消毒,然后再洗涤。
7、工作结束,收拾好工作台上的样品及器材,最后用消毒液擦拭工作台。
五、消毒灭菌方法
无菌室的消毒灭菌,可采取以下几种方法:
1、用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸:一般每平方米需40%甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升,进行熏蒸。使用时,先密闭门窗,量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾,人员随之离开接种室,关紧房门,熏蒸20—30分钟即可。
2、0.1%升水消毒:用0.1%升水浸过的纱布或海绵进行指擦,或用喷雾器喷雾灭菌,使箱内的上下左右都沾上升水,手也可用升水消毒,并把袖子卷起来。喷雾后 20~30分钟,箱内的杂菌和雾滴一起落到箱底被杀死,内部的空气就变得很清洁。
3、紫外线照射灭菌:在无菌箱中装一支200伏、3O瓦的紫外线灯管;每次开20~30分钟,就能达到空间杀菌的 目的。照射结束后,罩黑布半小时,以增强杀菌效果。
4、石炭酸喷雾:在每次接种之前,用5%石炭酸溶液喷雾,可促使空气中的微粒和杂菌沉降,防止桌面微尘飞扬,并有杀菌作用。
5、石灰揩擦:经常用药物熏蒸,易造成酸性环境,特别用甲醛和高锰酸钾熏蒸长久,污染往往越来越严重,预防办法可把各种药品交替使用,过一段时间(约五周)用石灰擦洗一遍。实践证明,这样做效果很好。
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