弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的应用!
一、背景
弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞是来源于弥漫大B细胞淋巴瘤患者血液、淋巴组织的贴壁细胞系,主要用于体外弥漫性大B细胞淋巴瘤的研究。
弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是成人淋巴瘤中最常见的一种类型,在临床表现和预后等方面具高度异质性。
弥漫性大B细胞淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤的一种,也是成人最常见的淋巴系统肿瘤,主要指的是细胞核大于2个正常淋巴细胞的大B细胞构成的,伴有弥漫生长的肿瘤。常见的临床症状,就是无痛性、进行性淋巴结肿大和结外肿块,这是典型的弥漫大B的临床表现。
常常伴有发热、乏力和盗汗。另外,40%的肿瘤原发于结外,最常见累及的部位是胃肠道,其他部位也常常发生。但是,原发于骨髓或者直接累及血液的比较少。肿块生长比较迅速,肿块可以在相应部位引起压迫症状,随着病情的发展,常发生扩散。
二、弥漫大B细胞淋巴瘤细胞传代步骤:
将0.25%含EDTA胰酶置于37°预热,倒掉培养瓶中的培养基,往培养瓶中加入1mlPBS,轻晃洗涤后弃去。
往瓶中加1ml预热好的胰酶,置于37°孵育消化(每次消化需时常取出置于显微镜下观察,以显微镜下细胞触角回收变圆、轻拍瓶壁见细胞脱落为消化时间,记录消化时间,以便于下次消化),消化好后加入1ml完全培养基终止消化。
用移液枪轻轻吹打瓶壁上的细胞,使之完全脱落,然后收集细胞悬液,1200rpm离心3min,弃上清,加入完全培养基重悬细胞,进行传代。
三、应用
用于长链非编码RNA HULC在眼眶弥漫性大B细胞淋巴瘤中的作用及机制研究:
1、检测HULC和miR-29c-5p在眼眶DLBCL组织中的表达情况。
2、研究HULC敲除和HULC-miR-29c-5p axis对DLBCL细胞增殖、侵袭、凋亡以及MAPK/ERK信号通路的影响。
3、进一步研究HULC敲除对DLBCL移植瘤生长以及移植瘤中miR-29c-5p表达、细胞增殖、MAPK/ERK信号通路的影响。
方法:1、HE染色观察眼眶弥漫性大B细胞淋巴瘤的病理组织形态特征。
2、利用qRT-PCR检测HULC和miR-29c-5p在眼眶DLBCL组织中的表达情况。
结果:1、HE染色发现眼眶弥漫性大B细胞淋巴瘤组织中肿瘤细胞弥散分布,体积大,呈圆形,核大,嗜碱性染色,核分裂像多见。
2、与癌旁正常组织与反应性淋巴增生组织相比,在眼眶DLBCL组织中HULC表达明显上调,miR-29c-5p表达明显下调。
HULC对DLBCL细胞生物学功能的影响及分子机制方法:
1、构建pLenti-sh-HULC、pLenti-HULC以及pLenti-miR-29c-5p慢病毒载体。将构建好的慢病毒载体进行病毒包装和滴定,之后进行病毒感染Pfeiffer细胞,经筛选得到稳定转染细胞系。
2、CCK-8、Transwell、流式细胞术实验检测Pfeiffer细胞增殖、侵袭以及凋亡情况。
3、利用Western blot检测Pfeiffer细胞中MAPK/ERK信号通路相关蛋白p-MEK1/2、p-ERK的表达情况。
4、利用qRT-PCR检测HULC和miR-29c-5p在外周血单个核细胞(PBMC细胞)和Pfeiffer细胞中的表达情况。
5、生物信息学预测能与HULC结合的miRNA。双荧光素酶报告基因实验验证HULC与miR-29c-5p的关系。
欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!
IM-9 (人外周血B淋巴细胞)的转化方法与实验步骤!
帕氏食氢产水菌的形态特征与实验内容及使用范围!
ATCC 27340 延长布劳特氏菌的培养方法与操作步骤!
免疫细胞临床与免疫细胞疗法:未来医学的新方法!
相关产品
沙门氏菌生化鉴定试剂盒(GB)
安洁清4号实验室玻璃器皿专用洗涤剂
Hymenobacter fastidiosus
Conexibacter woesei
Conchiformibius steedae
Conchiformibius kuhniae
Companilactobacillus zhongbaensis
Companilactobacillus versmoldensis
Companilactobacillus tucceti
Companilactobacillus suantsaicola
Companilactobacillus paralimentarius
Companilactobacillus pabuli
Desulfobacter hydrogenophilus
Desulfobacter latus
Desulfobacterium autotrophicum
关注
拨打电话
留言咨询