人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞的处理与培养方法!
细胞简介
平台编号:bio-81818
规格:5×10⁵cells/T25培养瓶
拉丁属名:SK-OV-3/DDP
细胞名称:SK-OV-3/DDP(人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞)
种属:人
年龄(性别):
组织来源:卵巢腺癌
生长特性:细胞形态
生长培养基:McCoy's 5A(货号:PM150710)+DDP+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞接收后的处理方法
1、冻存细胞接收后的处理:
1)干冰运输,收到细胞后立即转入液氮或直接复苏;
2)收到细胞后,若发现干冰已经完全挥发、冻存管瓶盖破裂脱落,请立即拍照后与我们联系。
2、复苏细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,请首先检查培养瓶是否破损或漏液,培养液是否混浊,如有漏液及培养液混浊情况请立即拍照把图片发给我们。
2)75%酒精消毒瓶身后放培养箱中静置4-6h后,在显微镜下确认细胞状态并拍照100倍和200倍的照片,若有贴壁细胞脱落,可收集上清离心,将沉淀用新的培养基接种至新的培养瓶或培养皿中。
3)建议收到当天不要消化处理,如果细胞长满90%,可选择传代处理。
4)如您收到细胞3天内没有反馈相关问题,出现的细胞问题将不提供免费重发服务。
人卵巢腺癌顺铂耐药性细胞培养方法
1)细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;
③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;
④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;
⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2)细胞复苏:
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。
②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好是进行细胞冻存
①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入2ml0.25%胰酶(T25瓶)
②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;
③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;
④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
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