甲型溶血性链球菌的培养方法与使用范围!
甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus)是2019年全国科学技术名词审定委员会公布的感染病学名词。链球菌属菌种。菌落周围有1~2mm宽的草绿色溶血环,大多为条件致病菌。
一、菌种简介
平台编号:bio-00006
规格:冻干粉
拉丁属名:α-Hemolytic streptococcus
菌株名称:甲型溶血性链球菌
培养基:血琼脂培养基(培养基 109)或适宜培养基。
培养条件:35~37℃,需氧
保存条件:常温,避光
批号:32213-8
用途:教学
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
二、启开方法
1)复苏菌种前应准备各适于该菌种生长的固体、液体培养基和培养设备,所 有操作均应在合适的生物安全防护条 件下进行;
2)启开菌种宜采用锯开法(锯开前用 75% 酒精棉消毒菌种管外壁)。用吸管将液体培养基 0.5ml 左右注入被启开的菌种安瓿中并吹打,使安瓿中的冻干菌种溶解成菌悬液;
3)将上述菌悬液全部吸出,分别接种到固体斜面和液体培养基中,于 35~37℃培养箱中培养 18~24 小时;
4)次日观察菌种的生长情况,如菌种未生长,应继续培养至 72 小时;
5)复苏后的菌种按规定使用。
三、培养方法
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
四、使用范围
(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。
(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。
(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。
五、注意事项
1、该菌种仅限用于实验室检验及研究用,不能用于商业用途。
2、如使用该菌种发表文章,应在文章中注明。
3、本中心仅对从本中心直接获取菌种的客户负责。
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