人早幼粒急性白血病细胞的应用!
一、背景
人早幼粒急性白血病细胞由Collins SJ从一位患有急性早幼粒细胞性白血病的36岁白人女性的外周血中分离建立;可自发分化,或在丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1%to 1.5%)、放线菌素D和视黄酸的刺激下发生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应,癌基因myc阳性,表达补体受体和FcR。
急性早幼粒细胞白血病是一种血癌,是由15号和17号染色体包含的遗传物质发生重组(易位)而诱发的。此种染色体易位,在医学上被记作t(15;17),指的是15号染色体的PML基因中的某些遗传物质与17号染色体的RARA基因中的某些遗传物质发生的移位现象。在个体一生中的任何阶段,特定细胞中的某些基因突变都有可能发生。
15号染色体包含的PML基因为某些蛋白质的合成提供遗传指令编码,该类蛋白质有抑制肿瘤生长的功能,即:此类蛋白质可阻止细胞恶性失控地生长或分化。PML蛋白可抑制恶性细胞的生长与分化,和其他蛋白质一样,可促进人体新陈代谢。
17号染色体上的RARA基因,为生成转录因子(α视黄酸受体)提供遗传指令编码。转录因子是一类位于DNA特定区域的蛋白,有助于控制特定基因的某些遗传学表达活动。
正常情况下,RARα蛋白控制着某些基因的转录过程,在早幼粒细胞阶段过后,这些基因对于白细胞的分化和成熟是至关重要的。PML-RARα合成蛋白会影响PML,RARα蛋白的原本发挥的正常功能。因此,某些血细胞在早幼粒阶段便会附着在一起,或是异常激增。多余的早幼粒细胞累积在骨髓中,而正常的白细胞却无法形成,从而导致急性早幼粒细胞白血病。
二、应用
用于急性髓系白血病Galectin-3表达及其意义研究:
1、选择298例初诊非M3型急性髓系白血病患者、108例初诊急性早幼粒细胞白血病患者为研究对象,疾病的诊断及分型依据英法美(FAB)协作组及世界卫生组织(WHO)对AML的分型诊断标准,严格遵照纳入及排除标准。另外选择30例正常人作为对照组。
2、血清Galectin-3蛋白测定采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者及正常人血清中Galectin-3蛋白表达水平操作步骤严格按照ELISA试剂盒说明书进行。
3、临床资料的回顾性分析对所有患者初诊时及序贯性治疗的病例资料进行回顾性分析,比较Galectin-3蛋白表达与临床特征、临床分期、实验室检查结果及治疗效果的关系。
4、患者随访住院序贯性治疗的患者以其住院资料作为随访依据,结束治疗的患者院外随访多数通过电话,少数采用走访。非M3型急性髓系白血病研究组平均随访期为25.8个月,急性早幼粒细胞白血病研究组平均随访期为30.3个月。
5、统计学分析采用SPSS20.0软件进行统计学分析,两组间均数比较采用t检验;率的检验采用卡方检验(样本量少时采用Fisher确切概率检验);不同变量的相关性分析采用Spearman秩相关分析法;生存分析采用Kaplan-Meier方法,单因素分析采用log-rank检验,多因素分析采用Cox比例风险模型;以P<0.05为差异有统计学意义。
结果:血清Galectin-3蛋白的表达情况非M3型急性髓系白血病患者血清Galectin-3蛋白表达水平明显高于正常人(5.40±4.31 vs 2.21±1.84 ng/ml;P<0.001),其中在M5型患者中表达量最高,M1型表达量最低;急性髓系白血病完全缓解期Galectin-3蛋白水平明显下降(P<0.001),复发时Galectin-3表达水平明显增高(P=0.048),但复发与初诊时比较无明显差异。
急性早幼粒细胞白血病患者血清Galectin-3蛋白表达水平明显高于正常人(4.09±2.25 vs 2.21±1.84 ng/ml;P<0.001),但显著低于非M3型急性髓系白血病患者(P=0.003)。
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