ATCC 56765里氏木霉的保藏条件与注意事项!
里氏木霉(Trichodermareesei)是多细胞的真核微生物,红褐肉座菌(Hypocrea jecorina)的无性型,隶属于丛梗孢目(Moniliales)木霉属(Trichoderma)。其作为工业菌株用于生产分解不同植物材料的酶类,包括纤维素酶、半纤维素酶、蛋白酶、淀粉酶等,已有多年历史。
一、菌种简介
平台编号:bio-67985
规格:冻干物
拉丁属名:Trichoderma reesei
菌株名称:里氏木霉
其他编号:ATCC 56765=NRRL 11460 =NRCC 2906
来源历史:←美国ATCC←NRRL←Rutgers Univ. RUT-C30
培养基编号:17,144,151
培养温度:25-28℃
培养时间:5-7 天
用途:乙酰胆碱酯酶、碱性木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、α-葡萄糖醛酸酶、纤维二糖水解酶I和II、内切葡聚糖酶、果胶酶、纤维素酶等
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
培养基信息
培养基编号:17
名称:Synthetic Potato Medium (综合马铃薯培养基)
可用于培养菌种:适用范围:米曲霉、酱油曲霉、栖土曲霉、宇佐美曲霉、出芽短梗霉、白僵霉、灰葡萄孢、顶头孢霉、巴西毛客、
备注:20%Potato extract (马铃薯汁) 1L Glucose (葡萄糖) 20gKH2PO4 3g MgSO4.7H2O 1.5gVitanib B1 (硫胺素) Trace (微量) Agar (琼脂) 15gpH 6
培养基编号:144
名称:YM 培养基
备注:酵母提取物 3.0 g 麦芽提取物 3.0 g 葡萄糖 10.0 g 蛋白栋 5.0 g 琼脂 20.0 g 蒸馏水 1000 ml pH 6.2 +/- 0.2
培养基编号:151
名称:ATCC Medium: 28 Emmons改良沙氏葡萄糖琼脂
备注:Neopeptone 10.0 g 葡萄糖 20.0 g 琼脂 20.0 g 蒸馏水 1000 ml pH 7.0 +/- 0.2此培养基是由正规的沙氏葡萄糖琼脂改变而来,具有减少量的葡萄糖和中性的pH。
二、培养基
综合马铃薯培养基(PDA)
20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g
Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然
20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。
三、保藏条件
斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。
四、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支斜面或平板;若直接接种液体培养基); 经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间;若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。
6)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;
7)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
8)西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖,注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。
9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。
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