兰小菇的生物特性与应用领域及培养与保藏！

北京百欧博伟生物技术有限公司

2023/10/20 17:23

兰小菇的生物特性与应用领域及培养与保藏！

兰小菇，小菇属一类真菌，多腐生于高山林间落叶上，对纤维素有强烈的分解能力，秋冬树叶脱落于地面，接触土表保湿的枯枝朽叶，小菇属真菌又可侵入具有生命力的天麻种子中，使种子共生萌发，因此小菇属一类真菌，主要营腐生生活，但也有兼性寄生的特性。

一、菌种简介

平台编号：Bio-32840

规格：培养物

拉丁属名：Mycena Violacella

中文名称：兰小菇

拉丁属名：Mycena

种名加词：violacella (Speg.) Singer

收藏时间*：2005-8-15

来源历史：中国林科院亚热带林业研究所

原产国：中国

资源归类编码：15152143108

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究；教学

生物危害程度：四类

致病对象：无

采集地区：山东金乡

培养基信息：培养基编号: 14 培养基名称: PDA

培养温度：25

资源保护类型：培养物

保藏方法：定期移植法

共享方式：公益性共享

提供形式：斜面培养物

实物状态：有实物

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、生物特性

1、好气

小菇属等天麻种子共生萌发菌，是一类好气真菌，它们在森林中主要分布在林间枯枝落叶层及表层土壤中，在培养过程中发现，如果培养料装得太多或瓶盖太紧，不会影响到这类菌的生长，生长速度延缓，处长培养时间。

2、对天麻块茎无侵染能力

小菇属真菌，是一种弱寄生菌，它们只能侵染天麻种胚基部细胞。还没有观察到侵染天麻种子发芽的原球茎和营养繁殖茎、米麻、白麻。当蜜环菌侵入原球茎分化出的营养繁殖茎后，小菇属真菌和蜜环菌可同时存在于同一个营养繁殖茎中，其对天麻的营养作用逐渐被蜜环菌所代替。

3、温度对菌丝体生长的影响

萌发菌在15 ℃-30 ℃温度范围内均能生长。以25 ℃菌丝生长最快，低于20 ℃或高于25 ℃菌丝生长速度明显减漫。

4、基物含水量对萌发菌生长的影响

将锯木屑和麦麸按体积1：1混合，结果表明，不同菌株对基物含水量要求不同。一般适宜含水量为基物重量的100-200%。

5、PH值对萌发菌生长的影响

试验结果表明，在培养过程中PH值向酸性方向变化。中性及偏酸性条件均利于小菇属真菌菌丝生长，但以PH值5.0-5.5最适宜，碱性条件不利于菌丝生长。

三、应用领域

天麻为我国名贵中药材，属异养性植物，种子必须靠小菇属（Mycena）一类真菌侵染才能正常发芽，其后的生长又需要蜜环菌菌索的侵入提供营养才能继续生长完成其生活史。天麻Seeds进行萌发与兰小菇orchidicola共生。天麻Gastrodiaelata种子与兰小菇Mycenaorchidicola的共生萌发试验表明兰小菇可与天麻种子共生促进天麻种子萌发并形成原球茎。

兰小菇（Mycena orchidicola）在石斛栽培中的应用技术，先分别培养菌根真菌和石斛苗，再将菌根真菌与石斛苗共生栽培。采用该项新技术，可大大缩短石斛的生长周期；提高石斛产量、有效成分含量。该项技术栽培方法简单、投资少、不施任何肥料和农药，生产出的石斛为绿色产品。

四、菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

五、保藏方法

1、传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4-6℃冰箱内保存。

2、液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3、载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4、寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5、冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20-30℃，-50-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6、冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液，以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。

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