淡紫色拟青霉的生理作用与保藏方法及注意事项！

北京百欧博伟生物技术有限公司

2024/01/17 17:22

淡紫色拟青霉的生理作用与保藏方法及注意事项！

淡紫拟青霉（（Paecilomyces lilacinus（Thorn.）Samson）属于内寄生性真菌，是一些植物寄生线虫的重要天敌，能够寄生于卵，也能侵染幼虫和雌虫，可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫、茎线虫等植物线虫病的危害。

一、菌种简介

平台编号：Bio-52586

规格：冻干物

拉丁属名：Paecilomyces Lilacinus

菌株名称：淡紫色拟青霉

其他编号：MCWA18

培养基编号：17

培养温度：25-28℃

培养时间：5-7 天

用途：防治线虫的真菌。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

综合马铃薯培养基（PDA）

20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3g

Vitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然

20%马铃薯汁配制方法：马铃薯洗净去皮，取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块，将滤液补足 1000ml。

三、保藏条件

安瓿瓶冻干菌种和培养物应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。甘油保藏温度为-80°C;请勿长期置于室温。

四、淡紫拟青霉的生理作用

1、促进植物生长

在培养拟青霉的过程中。，特别是在特殊培养基和深层发酵中，它能产生丰富的衍生物。其中一种类似吲哚乙酸产品，其显著的生理作用是在低浓度下促进植物根系和植物的生长。因此，在植物根部施用细菌不仅能明显抑制线虫侵染，促进植物营养器官的生长，还能促进种子的萌发和生长。

2、产生多种功能酶

该菌株能产生丰富的几丁质酶，能降解几丁质，促进线虫卵的孵化，增加拟青霉对线虫的寄生率，还能产生细胞溶解酶、葡聚糖酶和丝蛋白酶。Galvez-Mariscal研究表明，高效菌株中蛋白酶、葡聚糖酶和淀粉酶的活性分别高出1.2-4.2倍和20-120倍，这些酶促进细胞分裂。

3、退化效应

Somaseknar研究发现淡紫拟青霉能促进不溶性磷酸盐的溶解。实验室研究证实，拟青霉的增溶效果达到30%，其他线虫的增溶效果达到20%~40%。类似的研究还表明，拟青霉还能促进许多化学聚合物的分解(如农业和制革废水等。)，证明淡紫拟青霉具有一定的环保效果。

4、淡紫拟青霉

淡紫拟青霉是一种纯微生物活孢子制剂，具有高效、广谱、长效、安全、无污染、无残留的特点，能明显刺激作物生长。实验证明，应用淡紫拟青霉。植物根系周围不仅能明显抑制线虫侵染，还能促进植物根系和营养器官的生长，如播前拌种和种植时穴施，能促进种子萌发和幼苗生长，实现出苗充分、苗绿和苗壮，一般可使作物增产15%以上。

5、根结线虫的防治

有机蔬菜生产中植物线虫生物防治的主要生物类型，淡紫拟青霉，并提出了提高生物防治效果的途径。植物线虫在我国局部发生，危害严重。几乎每种作物都有一种或两种线虫，而且其中一些线虫的危害面积不断扩大，危害越来越大，已成为农业生产中急需解决的问题之一。淡紫拟青霉在植物根系周围施用淡紫拟青霉菌剂，不仅能明显抑制线虫侵染，还能促进植物根系和营养器官的生长。

传统的化学防治对农民有毒，危害绿色食品的生产，所以我们应该寻找新的技术。淡紫拟青霉对植物病原线虫的生物防治是目前的研究热点。已发现能控制线虫病的生物包括捕食线虫的真菌、线虫、涡虫、蚯蚓、昆虫、螨类等。寄生病毒、原生动物、细菌等。;也可以用植物提取物，防治效果也不错。

生物防治是目前疾病控制中很有前途的一种防治方法，符合环保健康的理念。然而，我国用于防治根结线虫的生防产品很少，对根结线虫有作用的生防制剂大多还处于研发阶段。目前唯一注册的生防产品是线虫、阿维菌素和最近注册的淡紫拟青霉。阿维菌素广泛应用于蔬菜根结线虫的防治。0.5%阿维菌素颗粒剂15-17.5克/亩可用于沟施或穴施。但阿维菌素作为一种生物农，有着几乎所有生物农都不可避免的弱点，即田间应用效果不稳定。

根结线虫病主要危害蔬菜根系，侧根和须根易受伤害。受影响的根产生不同大小的肿瘤或根瘤。根节起初白色柔软，后变为浅黄褐色或深褐色，表面粗糙，有时有裂纹。剖开根结，可见白色珍珠状颗粒，为根结线虫雌性成虫。感染根结线虫的蔬菜生长发育缓慢，叶片小而黄。病害严重时，植株矮小、衰弱或不良，天气炎热干燥时，植株容易枯萎甚至死亡。

五、注意事项

1）冻干粉首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板或者斜面，若接种液体培养基，则试管液体不超过 5ml 为宜）；

2）经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间；若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

3）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

4）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

5）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

6）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降或不活，请在收到后 2 个月内和微生物菌种查询网联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

9）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

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