嘴突凸脐蠕孢的形态特征与培养方法及实验内容！

北京百欧博伟生物技术有限公司

2024/01/25 16:27

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嘴突凸脐蠕孢的形态特征与培养方法及实验内容！

一、菌种简介

平台编号：Bio-14292

提供形式：斜面培养物

英文名称：Exserohilum rostratum

中文名称：嘴突凸脐蠕孢

属名：Exserohilum

种名加词：rostratum

来源历史：←中国农业科学院农业资源与农业区划研究所←山东农业大学

收藏时间：2006-12-31

原始编号：BDS fungi 054

原产国：中国

资源归类编码：15151520106

模式菌株：非模式菌株

主要用途：a:1:{i:0;s:4:研究;}

特征特性：自来水琼脂麦秆培养基（TWA+W）上菌落圆形，铺展，因菌丝体而灰褐色、青灰色或黑褐色，有气生菌丝，气生菌丝顶端或麦秆、培养基上产生分生孢子梗产孢，孢子量大。分生孢子梗黑褐色，单生或少数丛生，柱状，不分枝，基部稍膨大，顶端屈膝状延伸，较中下部略粗，多隔膜（培养中可达23个），培养中长度可达500µm，宽5-7µm，基部宽达13µm。分生孢子浅褐色到深褐色，椭圆形，近柱状或长喙状，两端钝圆，通常3-14假隔膜，两端或仅基部隔膜加厚，两端细胞颜色浅，脐点周围和顶端部位半透明；培养中分生孢子变小40-109.5×13-22µm。脐点明显凸出；第一隔膜产生在近基部，第二隔膜产生在近顶部，第三隔膜产生在中部。

具体用途：研究

生物危害程度：四类

致病对象：不清楚

分离基物：叶片

采集地：山东徂徕山

培养基编号1：0014

资源保藏类型：a:1:{i:0;s:6:培养物;}

保存方法：a:2:{i:0;s:15:-80℃冰箱冻结法;i:1;s:8:矿物油法;}

共享方式：a:1:{i:0;s:10:公益性共享;}

保藏条件：斜面菌种和冻干菌种应在2~8℃保存。

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、形态特征

PDA上，菌落灰褐色，中央隆起，棉絮状，边缘气生菌丝绒毛状，背面褐色，容易产孢。TWA+W上，菌落正圆形，平铺，生长快，25℃下，一周，扩展满皿，褐色，边缘或培养基中麦杆上产孢较多。菌丝淡褐色，光滑，具隔膜，多分枝，宽3－6μm。分生孢子梗单生或簇生于菌丝，褐色，光滑，多隔膜，长可达500μm。分生孢子淡褐色至中等褐色，椭圆形或近圆柱形，端部钝圆，基部有明显突出的脐点，3－10隔膜，常在两端有隔膜增厚现象，中等褐色，两端细胞颜色稍浅，65－95×18－25μm，平均80×22μm。

三、使用范围

(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。

(2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。

(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。

四、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在上延续使用半年左右。

6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。

五、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

六、注意事项

1、复苏后，微生物菌种应保藏于建议的温度、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退。

2、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我司不负责任。

3、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

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