申克氏孢子丝菌的培养特点与染色反应及诊断与治疗!
一、菌种简介
申克氏孢子丝菌(学名:Sporothrix schenckii)是一种全球常见的温感二形性真菌,也是Sporothrix属的唯一物种。申克氏孢子丝菌是引起孢子丝菌病的唯一病原菌。广泛分布于自然界,自土壤、腐木及植物表面可分离出本菌。申克氏孢子丝菌通过损伤的皮肤或粘膜感染人,可引起皮肤、皮下发生慢性结节性或溃疡性为特点的孢子丝菌病。也可侵犯肺、胃肠道、骨及中枢神经系统。病原菌通过血流播散,引起全身皮肤出现结节、脓肿。
二、形态和染色反应
申克氏孢子丝菌是一种二形的真菌,在组织中和在37℃培养时生长成酵母形态,但在30℃培养时则生长成丝状真菌。在30℃培养时,它能形成纤细、有横隔的分支菌丝,在短的支持菌丝上或直接在主菌丝的边上长出卵圆形的台轴分生孢子(sympodu—loconidia)。在脓汁中很难用显微镜找到此菌。在组织中有特征性的形态是类似长形酵母的细胞,有时候被描绘为“雪茄形”,长2-10/μm,宽1-3μm。
三、培养特点
此菌在所有常用的实验室培养基上都能生长,但在固体培养基上的生长比在液体中更为丰盛。麦芽糖能促进生长。在马铃薯葡萄糖琼脂上的生长也良好,特征性的棕黑色色素也看得最清楚。
在马铃薯斜面上于30℃培养时,第二天便出现带白色的丝状小菌落,以后逐渐增大和变黑,直到最后几乎成了黑色为止。菌落的表面呈羊毛状,这是因为有好气的短菌丝的缘故。年老的培养物的表面有皱纹和卷曲。
在mycobiotic琼脂上的生长与马铃薯上的生长相似,但菌落保持白色,而且粘附得很紧,因为菌丝体能深入到培养基里去。明胶缓慢地被液化,生长大多靠近表面,但沿穿刺线出现刺样的生长,表面生长可能有点变黑。Loeffler氏血清培养基在菌落下面稍凹陷,但不出现全面的液化。
四、流行病学和发病学
申克氏孢子丝菌是死的植物材料例如沼泽泥炭藓上常见的腐生菌,因此大多数病人是林业工作者、花匠和摆弄在地下潮湿条件下存放的撑木的矿工们。分生孢子在土壤中也常见。此菌通过皮肤伤口而侵入,通常的侵入部位是手、脚和头部。马和狗比别的动物受感染得更多。病变开始时是一个带红色小结节,可能淌出稀薄的浆液脓性液体。然后感染经淋巴管道而扩散。沿着这些管道形成了小结节,结节溃破出表面,排出淡黄色的粘稠脓汁。淋巴结也肿大。腿的皮下组织可能因淋巴液的积聚而增厚,淋巴管道中的病变限制了淋巴液返回到全身淋巴循环去。病变散播到别的组织去,在马是罕见的,但有时候可见于狗。
此菌在病变中为数稀少,通常可在巨噬细胞里面找到它。它是多形的,长出许多的芽。
五、免疫性
对抗感染的应答,既有体液的也有细胞介导的。在感染过程中,对抗酵母型的凝集素上升了。大约50%的有补体结合抗体。抗体效价的迅速上升表示预后良好。老的液体培养物的滤液(孢子丝菌素——sporolrichin)可使病畜产生特异性的迟发型过敏反应。
六、诊断
使用萤光抗体技术和PAS染色方法,能最清楚地在组织和脓汁中看到申克氏孢子丝菌的微小、球形和雪茄状的酵母体。这些方法是快速的,但是必须有标本在脑心浸剂或mycobiotic琼脂斜面上于37℃和30℃或室温培养的培养物的支持。典型菌落大约在一周后可以见到——起先是白色和光洁的, 以后变成棕色。酵母型是在37℃培养时产生的,这使申克氏孢子丝菌与由其他孢子丝菌引起的感染区别开,后者偶然也曾在人的皮下组织中引起病变。
诊断也可以通过用组织浸渍物或渗出物腹腔内接种小鼠来加以证实。小鼠在接种后一周产生腹膜炎,在腹腔渗出液中有大量的雪茄状,多形、正在出芽的酵母型。
七、化学疗法
建议用静脉注射或口服碘化钾来治疗病马,但常发生治疗失败。也曾建议用灰黄霉素来治疗病马。两性霉素B对人的治疗有效。
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