葡萄糖蛋白胨琼脂的分类与检验原理及使用方法!
一、背景
葡萄糖蛋白胨琼脂是一种常用的培养基,可以用于真菌检验。葡萄糖蛋白胨琼脂的成分包括葡萄糖、蛋白胨和琼脂,具有提供营养、维持培养环境、保持培养基湿度和提供细菌生长附着表面的作用。在制作过程中,需要将各成分混合在一起,加热溶解,然后分装到培养皿中,凝固后即可使用。
葡萄糖蛋白胨琼脂的用途广泛,可以用于分离和培养不同类型的微生物,如细菌、酵母菌和霉菌等。葡萄糖蛋白胨琼脂是一种合成培养基,其中的各种成分都是已知的化学物质,因此具有精确的组成成分和重复性,适用于科学研究。
二、葡萄糖蛋白胨琼脂是一种常用的细菌培养基,它的化学成分包括以下几类
碳源:葡萄糖是主要的碳源,能够提供微生物生长所需的能量。
氮源:蛋白胨是主要的氮源,能够提供微生物生长所需的氨基酸和蛋白质。
无机盐:琼脂是胶状凝固剂,能够提供微生物生长所需的附着表面;溴甲酚紫是一种指示剂,能够指示培养基的酸碱度;磷酸二氢钾、硫酸镁等则是微生物生长所必需的无机盐。
三、在使用葡萄糖蛋白胨琼脂时,需要注意以下几点
保持培养基的清洁和无菌,防止污染。
在使用前,需要将培养基加热至融化,然后迅速冷却至室温,以保持其物理性质和营养成分的稳定性。
葡萄糖蛋白胨琼脂在接种微生物时,需要保证操作的无菌性,以避免污染。
葡萄糖蛋白胨琼脂在培养过程中,需要保持适宜的温度和湿度条件,以促进微生物的生长和繁殖。
四、葡萄糖蛋白胨琼脂检验原理
胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖为可发酵的糖,溴甲酚紫是酸碱指示剂;琼脂为凝固剂。
五、葡萄糖蛋白胨琼脂用法
称取本品30.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。
六、应用
葡萄糖蛋白胨琼脂可以用于不同环境条件对球孢白僵菌菌株SJ-05的影响:
使用葡萄糖蛋白胨琼脂分离培养来自沙棘木蠹蛾虫体上的5个菌株SJ-01、SJ-02、SJ-03、SJ-04和SJ-05的产孢量、生长速率、萌发率等指标进行了测定。并研究了优良菌株在不同培养基上的产孢量、生长速率及人工继代培养的稳定性。
实验结果表明,SJ-05产孢量大,生长速率快,萌发率高。该菌株在不同培养基上各指标的测定表明,最适合菌株生长的培养基为马铃薯蔗糖蛋白胨琼脂培养基及葡萄糖蛋白胨琼脂。在分光光度计测菌株孢子含孢量的实验中,确定了菌株高孢粉的适宜稀释倍数为1000倍,菌株含孢量与吸光度值之间的方程为:y=100.9589x+0.2838(r2=0.9195)。菌株在50℃热胁迫下的拟合方程Is=1.0089/[1+exp(-3.6571+0.207812t)],半衰期LT50=18.2min,表明菌株耐热力较强。将菌株分生孢子置于不同萌发条件下,测定其萌发率。
测定结果表明:继代培养会延长菌株孢子萌发的时间,菌株孢子萌发的最适营养液为加入1%蚕蛹的微胶囊剂溶液,最适温度在25-30℃,最适pH值为6-8之间。在低湿度对萌发率的影响实验中,RH=72%时孢子均能萌发,但完全萌发的时间为RH=100%的3倍,而RH=61%的条件下,孢子未萌发。在光保护剂对孢子的保护作用实验中,照射时间在10h以内,光保护剂浓度为0.10%的荧光增白剂和浓度为0.15%的抗坏血酸Vc的保护作用最强,超过10h后,浓度为0.15%的抗坏血酸Vc的保护作用则超过浓度为0.10%的荧光增白剂,最后选择0.15%的抗坏血酸Vc为最适光保护剂。
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