微生物实验室的设备控制和程序及操作方法!
微生物检验常用需监控的设备和仪器:
1、培养箱(生化培养箱或CO2培养箱等)、干燥箱、高压灭菌锅、净化工作台、pH计、 冰箱,(低温冰箱或冷柜)温度计、紫外灯、显微镜、离心机、天平。
2、小计量容器
3、微生物测定仪器、微生物检定仪器、空气采样器、酶标仪专用等。
一、高压灭菌锅的温度控制
高压灭菌锅:生物指示菌法(常用)、化学变色纸片及高压灭菌锅温度计等方法进行检测。
生物指示菌法是一种高压灭菌锅的效果显示法。
高压灭菌锅由专人按作业指导书操作,并做好每一次的作业记录。
高压灭菌锅使用时,内置物品不能太多,单位体积内的内容物(每瓶内的培养基)不能太多。同时应注意内容物不同耐受温度。总的暴露时间最好不要超过45min。
高压灭菌锅日常工作记录应包含以下信息:高压灭菌的材料、开始时间、压力/温度、取出时间、高压灭菌胶带的颜色变化(日常常用无菌培养代替)。
高压灭菌锅温度波动范围:110,115和121±2℃。
高压灭菌锅校准周期一般在半年。
二、干燥灭菌箱温度控制
干燥灭菌箱日常工作记录中应包括以下信息:开始的时间、到达灭菌温度时的时间、取出的时间(或关闭时间)。
干燥灭菌箱的温度校准;用参考温度计进行温度测试。
干燥灭菌箱温度要求与精确度:160±5 ℃或180 ±5 ℃。前者为灭菌2h,后者为30min。
干燥灭菌箱校准时间一般为一年。
三、培养基配制用蒸馏水的控制
对于蒸馏水器来说:按设备说明,定期清洁离子交换器和更换离子交换材料。
检测要求:西欧标准为微生物检验用蒸馏水的特定电导率<0.5ms/m;细菌数<50CFU/ml。我们的国家标准要求电导率≤25μS/cm,菌落总数不超过1000CFU/mL。
检测频率:1次/每月。
蒸馏水定点供应,并做好相应的质量控制,记录检测结果。
四、天平的管理
天平放置要求:无振动、无气流影响及水平台面上。
天平要有使用及运行检查记录。
天平作为计量仪器是列入国家强制检定的范围,一般1次/年进行检定。
运行检查频率按运行计划或按产品(天平生产厂家)给出的标准重量单位进行对照。
五、pH计
pH计使用前应用标准液进行校准。
缓冲液使用有效期:PH4.00 约6个月;
PH7.00 约6个月;
pH9.00 约6个月;
pH计的维护:电极外表的定期清洗;电极敏感性检测及极性恢复。
六、净化工作台的控制
水平流净化工作台工作区域,要求洁净度为100级。空气沉降30min,细菌数<1CFU/皿。垂直流净化工作台,细菌数<0.49CFU/皿。
净化工作台运行检查频次:1次/月主要是细菌沉降检测。
净化工作台高效过滤膜一般为一年更换一次,并同时进行粒子与细菌沉降检测。
七、紫外线灯的控制
检测方法:仪器测试法和生物测试法。前者是通过专用仪器检测紫外灯管发射的紫外光强度。国家消毒技术规范中表明在距离照射下方垂直1米处,要求其强度为大于90uW/cm2。
生物测试法:采用一定的菌培养物,经一定比例稀释,菌量控制在200-250个/0.5ml,涂布平板在紫外灯光下照射,2min,同时设置普通光源的对照组,后置37℃48h,计算其杀灭率。要求杀灭率达99%。
八、显微镜的控制
显微镜应制定作业指导书,日常维护记录及自校记录。
显微镜应置于无振动,避免灰尘,防潮等要求的环境。
九、其它微生物检测专用仪器的控制
细菌鉴定仪、酶标仪等设备,工作中常用阳性对照检测其功能正常性。
仪器的检定则按有关的部门检定或按自校作业指导书进行。
仪器的使用登记、校准计划、校准记录等文件存档。
仪器专人使用、操作者应取得相应的岗位培训合格,持证上岗。
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