微生物培养基的概念与分类及储存与制备!
1、培养基的制备
培养基是指人们根据微生物生长繁殖所需的各类营养物质,按一定的浓度由人工方法混合配合而成的用于培育微生物生长的一类营养基质而称之。培养基是微生物生长的物质基础,是微生物检测工作的重要基础工作。按使用时的不同物理状态,培养基可分为:液体培养基、半固体培养基、固体培养基3种。根据不同用途(使用目的),培养基又可分为:基础培养基、富集培养基(营养或增殖培养基)、选择性培养基、鉴别培养基、厌氧培养基5类 。另外按其营养成分和浓度是否已知可分为:合成培养基(营养成分和浓度已知)、天然培养基(营养成分和浓度未知)2种。有关培养基的基础知识可参考有关专著和其他有关微生物学教科书。
2、培养基的储存
一般来说,未开封的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。已配制好的培养基、缓冲液一般可储存于2—25℃阴凉干燥处,有条件置冰箱冷藏储存更好,否则必须在2d内使用完毕。USP中有明确规定:置2—25℃阴凉干燥处如果培养基分装并储存于非密闭性容器内(如试管、三角烧瓶),则其使用期限为1个月,但该培养基 的灵敏度试验和其他 的相关质量检查务必在距使用时的前2周内完成;如果培养基储存于密闭性容器(如螺旋盖瓶)内,则其使用期限为1年,但该培养基的灵敏度试验和其他的相关质量检查须在距使用前3个月内完成:如果实验室购买的成品型培养基储存于密闭容器内,实验室可抽取部分代表性样品进行无菌检查试验和灵敏度试验。并根据自己的储存条件来制定合理的培养基储存期,对培养基的存储环境条件进行监控和记录,并且要对相应的储存期和储存条件进行确认。
灭菌后的培养基等物品应置适当条件下保存至规定的有效期,并对保存条件进行确证。
表 无菌物品的存储条件
类型 存放条件 无菌保效期(年、月、d)
输液瓶密封装培养基 2—8℃ 1年
输液瓶密封装淋洗液、缓冲液 室温 2年
螺旋盖瓶装培养基 2—8℃ 3个月
螺旋盖瓶装淋洗液、缓冲液 室温 3个月
试管装无菌培养基(固液) 2—8℃ 14d
试管装有其他的无菌试剂 室温 14d
平皿琼脂培养 25—35℃下培养3d后,存于2—8℃ 14d
取样用螺旋盖瓶 室温 7d
过滤器等无菌操作用物品 室温,洁净室 内或层流台内 7d
表 培养基 2—8℃条件 保存期限
培养基种类 保存条件 保存时间
平板培养基 不袋装 2周
袋装 6—8周
试管培养基 不袋装 2—4周
(棉塞) 袋装 8—10周
试管培养基 不袋装 8周
(软木塞或蜡封) 袋装 16—18周
有效期已过的培养基、缓冲液、稀释液、淋洗液和试剂必须立即丢弃,不得再用于检测中。实验室应建立简易的库存控制系统,有专人保管和建立台账,包括品名、规格、批号、数量、有效期、进货日期、使用日期和数量、以及领用人等信息,以随时掌握有关信息。
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