肉色明串珠菌的菌株培养与化学机理及实验内容!
肉色明串珠菌,革兰氏阳性细菌,是一类不产生孢子,G+C含量低于50%的革兰氏阳性细菌,可以在厌氧或有氧条件下生长,通常表现为过氧化氢酶阴性,不水解精氨酸,其细胞大小为0.5~0.7x0.7~1.2μm。
一、菌种简介
平台编号:Bio-03472
提供形式:冻干物
拉丁属名:Leuconostoc Carnosum
中文译名:肉色明串珠菌
拉丁学名:Leuconostoc carnosum
原始编号:JCM 9695
菌株来源:←中国科学院微生物研究所←日本
保藏人:周培瑾
直接来源国家:日本
保藏时间:3/7/2000
其他保藏编号:=ATCC 49367 =CCUG 30059 =CIP 103319 =DSM 5576 =KCTC 3525 =LMG 11498
生物危害:四类
模式菌株:模式菌株
菌株用途:模式菌株。
培养温度:30℃
培养基:0006
其他培养条件
分离源:真空包装的肉
用途:模式菌株。
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
二、化学机理
明串珠菌细胞球状,直径0.9—1.2微米,成对、成短链或长链。在蔗糖溶液中,链外常有一厚厚的、胶质的无色葡聚糖荚膜,即代血浆(右旋糖酐)。革兰氏染色阳性,菌落小,灰白,隆起。不液化明胶,发酵多种糖产酸产气,不还原硝酸盐,不产吲哚,微好氧或兼性厌氧。此菌是制糖工业的一种危害菌,常使糖液发黏稠而无法加工。常存在于水果、蔬菜中,能在含高浓度糖的食品中生长。
三、菌株培养
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯 菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在 上延续使用半年左右。
6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
四、实验内容
1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查
2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物
3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查
4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌
五、注意事项
1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。
2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。
3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。
4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。
5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。
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