EASYSPIN细菌RNA快速提取试剂盒的提取方法与注意事项!
一、知识概述
EASYSPIN细菌RNA快速提取试剂盒采用独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高盐状态下选择性吸附于离心柱内玻璃纤维素膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNasefreeH20将纯净RNA从玻璃纤维素膜上洗脱。
二、产品特点
1、离心吸附柱内玻璃纤维素膜全部采用进口特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2、不使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
3、快速简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4、多次过柱漂洗可确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9-2.0,基本无DNA残留,可用于RT-PCR,Northern-blot和各种实验。
三、使用范围
适用于快速提取细菌总RNA。
四、提取方法
细菌RNA快速提取试剂盒基于独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,然后用乙醇调节结合条件后,总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的去蛋白、漂洗的步骤将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNaseFreeH2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。
五、注意事项
1、裂解液RLT和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
2、所有离心操作步骤,均可在室温(15-25℃)下进行。
3、提取细菌RNA需先配制加了溶菌酶或者Lysostaphin的TE(10mMTris-HCl,1mMEDTA),TE中已加入溶菌酶或者Lysostaphin,浓度为1mg/mL。
微生物菌种查询网作为中国微生物菌种中心引航者,单位代为引进美国ATCC微生物菌种保藏中心,德国DSMZ菌种保藏中心,荷兰CBS菌种保藏中心,日本JCM微生物菌种保藏中心,包括其中的ATCC微生物细菌与噬菌体(18382);细胞系和杂交瘤(4997);真菌和酵母(58183);原代细胞(146);原生动物和藻类(2428);干细胞(102);载体,克隆与分子(18006);病毒(3594);核酸 - DNA / RNA(1350),引进进口微生物菌种货期短,质量保证,UPS国际快递运输。
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