供货周期: | 现货 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | T-25 flasks |
货号: | bio-73166 |
CAS号: |
通过STR鉴定的:人结肠癌细胞
一、细胞简介
平台编号:bio-73166
拉丁属名:SW620
细胞名称:SW620(人结肠癌细胞)
种属:人
年龄(性别):男;51岁
组织来源:结直肠腺癌,来自转移淋巴结
生长特性:贴壁
细胞形态:上皮细胞样
背景描述:SW620细胞是从一个51岁男性白人组织中分离得到的,由A·Leibovitz等从一个淋巴结建株。SW620细胞主要由无绒毛的小园球细胞和双极细胞组成;SW620细胞仅合成少量癌胚抗原(CEA),在裸鼠中有高度的致瘤性。
生长培养基:DMEM高糖(货号:PM150210)+10% FBS(货号:164210-500)+1% P/S(货号:PB180120)
培养条件:气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃
运输方式:快递干冰运输(1 vial)或活细胞运输(T-25 flasks)。
注意事项:(1)严格无菌操作;
(2)本产品只供科研使用,不可应用于临床。
二、SW620(人结肠癌细胞)生长:初代培养或传代的细胞悬液接种以后,经过长短不同的潜伏期后开始增殖。传代细胞系、胚胎组织或幼体组织一般在第二天即可见细胞生长,一周内便可连接成片。接种细胞长满瓶壁后,应及时做再培养。否则由于营养物消耗和代谢积累,细胞即进入停止期或退化期。此时细胞轮廓增强,细胞内常出现颗粒状堆积物,为膨胀的线粒体,SW620(人结肠癌细胞)质呈空泡化,细胞变圆、粗糙,严重时细胞从瓶壁脱落,只有及时再做传代处理,才能使细胞继续生长繁殖。
三、SW620(人结肠癌细胞)功能:
(1)血管平滑肌细胞的再生能力是原发血管病变的重要因素。
(2)表达钙通道及ICAM-1和VCAM-1,参与血管壁的炎症反应。
(3)与血管疾病的进展和稳定有关。
生理变化:
(1)主动脉硬化。
(2)主动脉瘤
(3)主动脉钙化。
基本特性:
(1)组织来源于正常大鼠大动脉组织。
(2)鉴定:肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色。
(3)原代细胞培养末期液氮冻存。
(4)每冻存管细胞数:>5×105 cells/1ml。
(5)肌动蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫荧光染色验证。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
四、SW620(人结肠癌细胞)具体操作
1、处死孕鼠,全身置于75%酒精里浸泡,然后在超净台中用剪刀和镊子将孕鼠皮肤剪开,用另外一组剪刀、镊子剪开腹部肌层,露出子宫,*后用第三组剪刀和镊子将子宫小心取出放在盛有D-PBS的玻璃平皿中,冲洗去血。
2、用两把弯镊子将胚胎外的胞膜小心去除,然后夹掉头和内脏,将其余胚胎转移到一个装有30 ml D-PBS的50 ml离心管中,轻轻颠倒两次,倒掉D-PBS,再重复此步骤一次,注意要留少许D-PBS,然后将胚胎转移到另一装有D-PBS的平皿中,并用手术刀片将其细细切碎。
3、用200 ul的移液枪反复、快速地吹打平皿中的液体,转移至15 ml离心管中,于4℃ 1500 rpm离心5分钟,倒掉上清,以10 ml胰酶重悬沉淀,放在37℃水浴中消化30分钟,且每隔五分钟轻轻晃动,使之充分消化。
4、将上层细胞悬液倒入一个装有10 ml MEF生长培养基的50 ml离心管中,用200目的尼龙网过滤后,以1 500 rpm离心5分钟收集细胞,再用30 ml MEF生长培养基洗涤两次。
5、细胞沉淀用15 ml MEF生长培养基重悬后进行细胞计数(一般8只14天的胎鼠可获得2-3x107细胞)。
6、3x106细胞悬浮于15 ml MEF生长培养基中,接种到200 ml培养瓶中。
7、24小时后更换新鲜的MEF生长培养基。
8、细胞长满后,先用D-PBS冲洗,倒掉后加胰酶消化(此步时间不宜过长,作者一般不超过五分钟),按1:5传代。
9、细胞再次长到覆盖率80-90%左右,将其消化后,常规冻存(冻存液要现配)。
五、注意事项
1、原代培养,一定要避免污染。
2、MEF生存能力有限,如果不冻存,体外存活十代左右。
3、冻存后复苏的细胞只能传代一次,因为这些细胞繁殖能力有限。
4、消化细胞时间不要过长。
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