供货周期: | 现货 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | 冻干物 |
货号: | bio-053098 |
CAS号: |
ATCC 39920 马链球菌兽疫亚种知识解析!
马链球菌兽疫亚种(S.equi subsp. zooepidimicus) 旧称兽疫链球菌,常存在于皮肤、呼吸道、扁桃体及生殖道,可致各种家畜的炎症和败血症。其中以马最易感,引起子宫炎、流产或不孕症、牛的乳腺炎,对羊和猪及禽类可引起败血性链球菌病。自然康复后可形成免疫力,国内研制的链球菌弱毒苗有一定的免疫效果。
一、基本信息
平台编号:bio-053098
规格:冻干物
拉丁属名:Streptococcus equi subsp. zooepidemicus
中文名: 马链球菌兽疫亚种
外文名: S.equi subsp. zooepidimicus
旧 称: 兽疫链球菌
常存在于: 皮肤、呼吸道、扁桃体及生殖道等
分子量: 8.02×10—4.01×10
属于类型: 兰氏分群的C群β溶血链球菌
其它编号:ATCC39920
培养基编号:116
培养温度:37
用途:生产超高分子量透明质酸
保藏条件:斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。
二、医用价值
马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi ssp. zooepidemicus, SEZ)属于兰氏分群的C群β溶血链球菌,能够感染多种动物及人类。在我国,该菌是猪链球菌病的主要病原,能引起猪的脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎及突发性死亡,并对相关从业人员的健康构成潜在威胁。尽管目前国内市场上已有多种预防C群链球菌疫苗,但其免疫保护效果往往不能令人满意,因此安全、高效的新型疫苗仍有待研究。本实验室已采用免疫蛋白组学方法筛选马链球菌兽疫亚种ATCC35246株细胞壁相关蛋白,并成功鉴定出10种免疫原性蛋白。多数蛋白在马链球菌兽疫亚种上未曾见报道,其是否为保护性抗原仍需进一步鉴定。本文根据GenBank上已公布的这10种蛋白的基因序列,分析选择免疫原性较好部分的基因序列设计并合成引物。以马链球菌兽疫亚种ATCC35246株基因组DNA为模板,通过PCR技术,扩增出目的基因并定向克隆至表达载体pET-32a(+)、pET-28a(+)中,然后将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)。通过PCR鉴定和重组质粒双 切鉴定后,挑取阳性克隆菌进行IPTG诱导表达。经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白均获得良好的表达,大小与预期值一致。Western-blot显示,融合蛋白均可被猪源ATCC35236株康复血清识别,表明其具有天然蛋白的部分抗原性。重组融合蛋白经亲和层析纯化后,与等量ISA206佐剂进行乳化。通过皮下免疫途径分组免疫ICR小鼠,并以ATCC35246全菌灭活苗和PBS作为对照组。用间接ELISA 法检测小鼠血清IgG 抗体,并通过体外调理吞噬试验测定抗血清的调理活性。结果表明重组蛋白免疫小鼠后能有效产生免疫应答,血清中抗体水平有明显升高,且有良好的补体依赖的调理吞噬功能。二免后以5LD50 ATCC35246 强毒株进行腹腔攻击,结果显示试验组存活率优于PBS对照组,其中免疫EF-G融合蛋白组小鼠的保护率达到50%,免疫TF、TK、GAPDH、PPH融合蛋白组均达到37.5%,表明原核表达产物免疫ICR小鼠,可使其对同源菌株攻击产生一定的保护作用,在亚单位疫苗研制中具有应用价值。
三、注意事项
1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 1-2 支平板上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;
2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;
4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;
5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。
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