供货周期: | 现货 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | 冻干物 |
货号: | bio-103896 |
CAS号: |
SKOV3/DDP细胞的使用方法与注意事项!
一、细胞简介
平台编号:bio-103896
拉丁属名:SKOV3/DDP
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
培养条件:RPMI-1640(Hyclone),90%;优质胎牛血清,10%。 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37℃。
传代方法:建议1:2-1:3 两天换液一次
冻存条件:完全培养基50%+40%FBS+10%DMSO
二、使用方法
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1.收到细胞,请查看瓶子是否有破裂,培养基是否漏出,是否浑浊,如有请尽快和我们联系。
2.如包装完好,取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,在显微镜下观察细胞形态是否正常,细胞的贴壁情况以及细胞密度,然后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时,以稳定细胞状态。
3.细胞状态稳定后,弃除培养瓶中大部分液体,只剩5-10ml左右培养液继续培养就可以了,超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。
4.细胞传代
1)吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS 2-3ml清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1.5ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按1:2等适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
三、注意事项
1.在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
2.传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态;
3.该细胞只可用于科研。
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