供货周期: | 两周 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
货号: | bio-119085 |
CAS号: | SK-BR-3+luc |
细胞介绍
1970年G.Trempe和L.J.Old从胸水中建立了这株细胞。没有病毒颗粒。超微结构特征包括微丝和桥粒,肝糖原颗粒,大溶酶体,成束的细胞质纤丝。SK-BR-3细胞株过表达HER2/c-erb-2基因产物。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带Luc基因。
细胞特性
1)来源:器官:乳腺;乳房疾病:腺癌取材转移灶:胸水
2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
3)含量:1x106细胞数
4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
5)用途:仅供科研使用。
细胞筛选
该细胞为稳定转染Luc的细胞,随细胞传代次数的增加,其Luc荧光强度会逐渐减弱。若实验要求需要维持荧光强度,可以加入嘌呤霉素进行再次筛选。
建议收到细胞后至少传3代,冻存留种后再进行筛选。
初次进行细胞筛选时,建议加入终浓度为1ug/ml嘌呤霉素的完全培养基维持培养,若无细胞漂浮或者漂浮较少,即可更换为含2ug/ml嘌呤霉素的完全培养基继续筛选,以此类推,至最高药物浓度为5ug/ml。若筛选过程中,漂浮细胞大于60%,则停止筛选,换成正常培养基培养,至细胞密度约80%,可继续加入同浓度嘌呤霉素进行筛选。当加入5ug/ml嘌呤霉素时细胞正常增殖,可停止筛选,用不含药完全培养基正常培养。
运输和保存
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3)贴壁细胞:细胞在37℃培养箱中放置2-3h,显微镜下观察细胞的生长和贴壁情况,有些贴壁细胞在快递运送过程中会因振动脱落和脱落后成团的情况。若镜下观察细胞的生长密度若在60%以下,可去除培养瓶中灌液培养基(若有未贴壁的细胞需要离心回收,重悬打入到原培养瓶中),加入新配制的完全培养基6-8mL,放到细胞培养箱中继续培养。若细胞生长密度达70%-80%以上,可以对细胞进行传代处理。传代过程中,若因运输振动脱落的细胞需要离心回收。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备McCOY's 5A或DMEM培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。
2)注意:该细胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好,大部分品牌的DMEM含有较高浓度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培养基培养细胞时需要提高CO2浓度(7%-10%)。复苏初期细胞贴壁不牢,会有悬浮细胞出现,在传代和换液时注意回收(1000rpm 5min)悬浮的细胞。细胞生长融合到80%以后会有悬浮细胞出现。
3)培养条件:气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
4)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
相关产品
Mortierella Sarnyensis
Cunninghamella Binariae
Cunninghamella Vesiculosa
Actinomucor Elegans Var. Kuwaitensis
Mucor Aligarensis
Mucor Gigasporus
蒙氏肠球菌 Enterococcus mundtii
Pediococcus claussenii
Pediococcus ethanolidurans
Azospirillum sp.
Pediococcus inopinatus
Rarobacter faecitabidus
Pediococcus parvulus
粪短状杆菌 Brachybacterium faecium
Pediococcus pentosaceus
关注
拨打电话
留言咨询