供货周期: | 现货 |
品牌: | 百欧博伟生物 |
规格: | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
货号: | bio-132187 |
CAS号: | NIH:OVCAR-8 |
平台编号:Bio-132187
一、细胞基本属性
细胞名称 NIH:OVCAR-8人卵巢癌腺癌细胞(STR鉴定正确)
种属来源 人
年龄性别 卵巢
生长特性 贴壁生长
细胞形态 上皮样细胞
细胞代数 10代以内
生物安全等级 1
细胞规格 1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
支原体检测 无
保藏机构 ATCC
培养基 1640 +10%FBS
培养条件 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
冻存条件 无血清冻存液,液氮储存
运输方式 复苏发货(T25瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用)
供应限制 仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主
二、细胞培养操作
收货方式 T25瓶 冻存管
收货处理 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁,将T25瓶置于37度培养箱放置2-4h,以便稳定细胞状态 收到细胞后,需立即转入液氮冻存或直接复苏
传代密度 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养 第二天换液并检查细胞密度
传代比例 首次传代建议1:2传代
1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿 一管细胞建议接种到6cm培养皿或者T25瓶
传代方法
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
注意事项
1.运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
2.因运输问题,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。
1.收货时若发现干冰化完,检查冻存管是否融化,若已融化需直接离心细胞接种观察,若未融化可以将细胞按正常步骤保存;
2.为保证细胞的高存活率,收到产品后,请立即解冻复苏细胞。
到货须知
1.收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2.静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
三、细胞冻存操作
冻存液配方 无血清冻存液,液氮储存
细胞密度 待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例
冻存方法 a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案
相关产品
Mortierella Globulifera
Mortierella Hypsicladia
Mortierella Mutabilis
Mortierella Nantahalensis
Lichtheimia Corymbifera
Absidia Fusca
Comamonas serinivorans
Comamonas badia
Colwellia piezophila
Flavobacterium xanthum
Collinsella tanakaei
Eubacterium callanderi
Paracoccus alcaliphilus
Pantoea ananatis
苍白空气芽胞杆菌 Aeribacillus pallidus
关注
拨打电话
留言咨询