供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 100T |
货号: | BES20066BO |
CAS号: |
产品概述
7-Aminoactinomycin D,简称7-AAD,是一种核酸染料,与DNA结合后可发出强烈的荧光,其荧光特性与PI相似,可被488nm氩离子激光激发,但其发射光谱较PI窄,且发射波长更长,对其他检测通道的干扰更小,在多色荧光分析中是PI的最佳替代品,可与多种488激发光激发的荧光染料联合使用,如FITC,PE等。 7-AAD是一种非渗透性荧光染料,可以用来检测无活性的细胞。该染料不能透过活细胞的细胞膜,但可穿透膜损伤细胞如晚期凋亡细胞或者坏死细胞的细胞膜,染料一旦进入细胞,它将结合到细胞内DNA分子上,形成具有高荧光性的加成物,可用来区分存活的早期细胞和坏死或晚期凋亡细胞,广泛用于流式细胞仪。 7-AAD最大激发波长为546nm,最da发射波长为647nm,可在流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。
保存温度
-20℃避光
注意事项
1.染料长期不用-20℃保存。避免反复冻融。
2.染色液A为DMSO溶液,冬季气温较低时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
4.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
1.流式细胞仪
2.荧光显微镜
适用样本
1.悬浮细胞
2.贴壁细胞
产品应用
1.流式细胞仪
2.荧光显微镜
试剂准备
1.PBS 缓冲液(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X))
2.或者HBSS(Hank's Balanced Salt Solution)
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
2.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
3.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
4.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定最佳条件。以下方法仅供参考。
5.染色浓度和时间根据不同样本的实际染色结果做相应调整。
6.染色后立即进行分析。
7.7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行,且仅仅染色死细胞。
使用方法
1. 染色工作液的配制:
根据样品数用相应的培养基或合适的缓冲液(如HBSS)将7-AAD染色液100倍-200倍稀释,配制成染色工作液。
2. 根据自身样本选择合适的步骤制备细胞样本。7-AAD染色一般在其它染色完成后再进行,且仅仅染色死细胞。
3. 离心收集细胞,用500μl染色工作液重悬细胞。
4. 孵育15-60分钟。
5. 用流式细胞仪或荧光显微镜检测结果。染料-DNA复合物的最da激发波长为545nm,最da发射波长为650nm。可以用488nm波长激发。流式细胞仪下(FL3通道)检测荧光强度。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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