供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 100UL |
货号: | BES20534BO |
CAS号: |
产品概述
细胞质染色试剂Calcein-AM是绿色荧光标记的细胞质探针,具有490 / 515nm的zui大激发/发射波长。 Calcein-AM是一种可对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,Calcein-AM由于在Calcein的基础上加强了疏水性,因此能够轻易穿透活细胞膜。当其进入到细胞质后,酯酶会将其水解为Calcein留在细胞内,发出强绿色荧光。与其它同类试剂(如BCECF-AM和Carboxy-fluorescein diacetate)相比,Calcein-AM是最适合作为荧光探针去染活细胞的,因为它的细胞毒性很低,而且不会抑制任何的细胞功能,如增殖和淋巴球的趋化性。 Calcein的激发和发射波长分别为490 nm和515 nm。Calcein -AM仅对活细胞染色。 Calcein, AM和PI经常被结合用来作为活细胞和死细胞的双重染色。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。 可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。 可以提供动物、植物、微生物、酵母、水产、家禽、兽类、土壤等样本的各种生化指标检测的数百种试剂盒产品。
保存温度
-20℃ 避光
注意事项
1.长期不用可以-20℃保存。
2.染色液Calcein AM注意防潮;避免反复冻融。
3.染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。融解后离心至管底部再打开螺旋盖。
4.注意需要加热融解,变成液体状态后离心至管底部再开盖。可以用手捂住使其融解或37℃短时间水浴。
5.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
6个月
检测方法
荧光显微镜/激光共聚焦
适用样本
动物细胞
产品应用
荧光显微镜/激光共聚焦
仪器准备
1.荧光显微镜/激光共聚焦
2.离心机
3.移液器
4.冰箱
5.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液 2.HBSS
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项
1.螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体洒落。
2.染色液为DMSO溶液,冬季气温较低时在室温时为凝固状态,极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解,吸头也需要放在培养箱预热,否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
3.使用前,先将本品取出回温至室温,并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
4.细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
5.标记的条件因细胞种类而异,根据不同样本的实际染色结果做相应调整,在每次实验前,请先根据不同的实验要求、细胞类型、细胞的膜通透性等进行优化,确定zui佳条件。
6.以下方法仅供参考,根据需要使用,或者参考文献的使用方法。
7.染色后立即进行分析。
8.本染色液可用于细胞涂片、细胞的检测。
9.由于Calcein-AM的工作液稳定性比较差,染色工作液必须现配现用,并且在当天用完。
10.Calcein-AM对湿度非常敏感,若是Calcein-AM溶液每次取完需要量后,必须紧紧密封盖子。建议根据单次用量,分装密封保存。不可使用含水的吸头。
11.试剂A母液请拧紧螺旋盖,避免受潮失效。
12.参考:可以使用以下方法来优化得到荧光染料的zui佳工作浓度。1) 用0.1%皂素或者0.1-0.5%地高辛孵育细胞10min,或者用70%乙醇孵育细胞30min,从而制备死细胞;2) 用15000倍-1500倍稀释(试剂盒中的母液)的PI溶液进行死细胞染色,以得到仅仅对细胞核染色,而不会对细胞质染色的zui佳工作浓度。3) 用1000倍-100倍稀释(试剂盒中的母液)的Calcein-AM进行死细胞染色,以得到不会对细胞质染色的zui佳工作浓度。然后用此浓度进行活细胞染色,去观察是否活细胞能被染色。
使用方法
1. 染色工作液的配制:
根据样品数按下列比例配制染色工作液。
用HBSS缓冲液或无血清培养基将染色液1000倍稀释,充分混匀,即成染色工作液A。
2. 收集样本细胞。
3. 用PBS洗涤细胞两次。
4. 用200ul染色工作液将细胞重悬。
5. 在室温或37℃避光孵育15-20分钟。
6. 用PBS洗涤细胞。
7. 用适量PBS重悬细胞。
8. 用荧光显微镜或流式细胞仪检测结果。zui大激发为490nm,zui大发射波长为515nm和617nm。
结果分析 :
荧光显微镜下,使用488nm波长激发,活细胞为黄绿色。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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