供货周期: | 一周 |
品牌: | 博尔森 |
规格: | 50T |
货号: | BES20741BO |
CAS号: |
产品概述
真菌核蛋白提取试剂盒是一种快速高效的高产核蛋白提取试剂盒。真菌核蛋白提取试剂盒提供全套试剂,可以从各种大型真菌(蕈菌)中提取核蛋白,也可以从小型真菌(霉菌)中提取核蛋白。可用于纯化蛋白的粗品制备及核蛋白制备。提取过程简单方便。 本试剂盒不可以用于酵母核蛋白提取,如果需要提取酵母核蛋白,请使用其他货号的试剂盒。 本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解真菌核组份。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物,阻止了蛋白酶对蛋白的降解,为提取高纯度的蛋白提供了保证。 本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
保存温度
2-8℃
注意事项
1.蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2-8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
2.蛋白酶抑制剂在2-8℃低温时是固体状态,从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴,变成液体状态后离心至管底部再开盖。
3.试剂拆封后请尽快使用完!
有效期
一年
检测方法
WB,IP等
适用样本
真菌
产品特点
1、 使用方便。
2、 含蛋白稳定剂,提取的蛋白稳定。
3、 紫外检测蛋白浓度时,背景干扰低。
4、 蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含6种独立的蛋白酶抑制剂;每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性。
产品应用
WB,IP等
仪器准备
1.离心机
2.振荡器
3.涡旋混匀器
4.移液器
5.冰箱
6.冰盒
试剂准备
1.PBS缓冲液
2.蛋白定量试剂盒
耗材准备
1.离心管
2.吸头
3.一次性手套
使用注意事项:
? 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
? 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
? 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀,不影响使用,溶解后正常使用。
? 如果试剂盒不能短时间内用完,蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
? 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
? 下游实验如果是进行特定蛋白酶的酶活性检测,提取液可以不加蛋白酶抑制剂,注意提取过程保持低温操作,缩短离心时间。
? 离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
g=r×1.118×10-5×rpm2 (r 为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米) 例如: 转速为3000rpm,有效离心半径为10 cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
使用方法
1. 提取液准备:
每200ul提取液B中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,充分混匀后置冰上备用。
2. 取100-200mg真菌组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
3. 加入500ul-1ml提取液A,用组织匀浆机/匀浆器充分匀浆。
4. 匀浆液在2-8℃振荡30分钟。
5. 将提取液在4℃下1000×g离心5分钟,弃上清,留沉淀。
6. 在沉淀中加入200μl冷的提取液B,高速涡旋振荡5秒。
7. 在2-8℃振荡40分钟-1小时。
8. 在4℃,12000-14000×g条件下离心10分钟。
9. 将上清吸入另一预冷的干净离心管,即可得到核蛋白。
10. 将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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